[发明专利]骨肉瘤诊断试剂盒及CPE基因在其制备中的用途无效
| 申请号： | 201410321530.6 | 申请日： | 2014-07-08 |
| 公开（公告）号： | CN104059987A | 公开（公告）日： | 2014-09-24 |
| 发明（设计）人： | 杨祚璋;杨义豪;李东奇;陈彦锦;刘雪峰 | 申请（专利权）人： | 杨祚璋 |
| 主分类号： | C12Q1/68 | 分类号： | C12Q1/68 |
| 代理公司： | 暂无信息 | 代理人： | 暂无信息 |
| 地址： | 650118 云南省昆*** | 国省代码： | 云南;53 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 骨肉 诊断 试剂盒 cpe 基因 制备 中的 用途 | ||
1.CPE基因在制备骨肉瘤诊断试剂盒中的用途，其特征在于，所述诊断试剂盒包含SYBR Green聚合酶链式反应体系、用于扩增CPE基因和管家基因的引物对；所述SYBR Green聚合酶链式反应体系包含：PCR缓冲液、dNTPs、SYBR Green荧光染料。
2.根据权利要求1所述的用途，其特征在于，所述扩增CPE基因的引物对的序列如下：正向引物序列为5'-AGCATCCAGTGATAACATC-3’，反向引物序列为5，-CTAGGCGGTCATTCTTAC-3’；所述管家基因是GAPDH，扩增GAPDH基因的正向引物序列为5’-TTTAACTCTGGTAAAGTGGATAT-3’，反向引物序列为5’-GGTGGAATCATATTGGAACA-3’。
3.根据权利要求1所述的用途，其特征在于，所述PCR缓冲液包含：25mM KCL、2.5mM MgCL2、200mM(NH4)2SO4。
4.根据权利要求1-3中任一项所述的用途，其特征在于，所述诊断试剂盒还包含M-MLV逆转录体系，所述逆转录体系包含：T重复寡核苷酸Oligo dT、逆转录反应液、M-MLV逆转录酶、RNA酶抑制剂、dNTPs。
5.根据权利要求4所述的用途，其特征在于，所述逆转录反应液包含：250mM PH8.3的Tris-HCL、375mM的KCL、15mM的MgCL2、50mM的DTT。
6.一种骨肉瘤的诊断试剂盒，其特征在于，所述诊断试剂盒包含SYBR Green聚合酶链式反应体系、用于扩增CPE基因和管家基因的引物对；所述SYBR Green聚合酶链式反应体系包含：PCR缓冲液、dNTPs、SYBR Green荧光染料。
7.根据权利要求6所述的诊断试剂盒，其特征在于，所述扩增CPE基因的引物对的序列如下：正向引物序列为5'-AGCATCCAGTGATAACATC-3’，反向引物序列为5，-CTAGGCGGTCATTCTTAC-3’；所述管家基因是GAPDH，扩增GAPDH基因的正向引物序列为5’-TTTAACTCTGGTAAAGTGGATAT-3’，反向引物序列为5’-GGTGGAATCATATTGGAACA-3’。
8.根据权利要求6所述的诊断试剂盒，其特征在于，所述PCR缓冲液包含：25mM KCL、2.5mM MgCL2、200mM(NH4)2SO4。
9.根据权利要求6-8中任一项所述的诊断试剂盒，其特征在于，所述诊断试剂盒还包含M-MLV逆转录体系，所述逆转录体系包含：T重复寡核苷酸Oligo dT、逆转录反应液、M-MLV逆转录酶、RNA酶抑制剂、dNTPs。
10.根据权利要求9所述的诊断试剂盒，其特征在于，所述逆转录反应液包含：250mM PH8.3的Tris-HCL、375mM的KCL、15mM的MgCL2、50mM的DTT。
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