[发明专利]生物组织低温保护剂及制备、使用方法有效
申请号: | 201410316055.3 | 申请日: | 2014-07-04 |
公开(公告)号: | CN104054695A | 公开(公告)日: | 2014-09-24 |
发明(设计)人: | 覃东立;张昌盛;李林海;王俊杰;张晓萌;钟震宇;王玉涛 | 申请(专利权)人: | 中国水产科学研究院黑龙江水产研究所 |
主分类号: | A01N1/00 | 分类号: | A01N1/00 |
代理公司: | 大庆知文知识产权代理有限公司 23115 | 代理人: | 吴江东 |
地址: | 150000 黑龙*** | 国省代码: | 黑龙江;23 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 生物 组织 低温 保护 制备 使用方法 | ||
技术领域
本发明涉及一种生物组织低温保护剂及制备、使用方法。
背景技术
生物新鲜组织离开活体或者原来的生存环境后,生物体的内源酶开始降解遗传物质,其降解速度与内源酶含量及温度有直接关系。目前,传统的生物技术是在液氮环境或超低温冰箱内对生物标本进行保藏。然而,低温环境中生物组织中的分解酶仍然会对组织进行溶解破坏作用,使细胞及遗传物质不断降解。
生物标本的保藏是一项长久的工作,标本的保存有的需要几十年甚至上百年。降解的生物标本既不能满足科学研究的需要也不能系统恢复生物的生存属性。所以,生物遗传物质的保存是生物标本保藏的一项重要内容,只有生物的遗传信息得以完整有效的保存下来,才是对物种真正意义的保存。
目前传统的保藏生物标本遗传信息的方法是进行低温保藏,低温保护剂对标本的保藏至关重要。研制无毒无刺激性的生物组织低温保护剂对生物标本遗传信息的保藏有重要作用。
发明内容
本发明的目的是提供一种能够长期保持新鲜组织不变质的生物组织低温保护剂及制备、使用方法。
上述的目的通过以下的技术方案实现:
一种生物组织低温保护剂,其组成包括:(NH4)2SO4、NaCl、NaSO4、NaNO3、KBrO3、超纯水,所述的(NH4)2SO4的重量份数为300-400 ,所述的NaCl的重量份数为2-3 ,所述的NaSO4的重量份数为18-25 ,所述的NaNO3的重量份数为0.2-0.3 ,所述的KBrO3的重量份数为0.1-0.2,所述的超纯水的重量份数为1000 。
所述的生物组织低温保护剂,所述的(NH4)2SO4的重量份数为300 ,所述的NaCl的重量份数为2,所述的NaSO4的重量份数为18 ,所述的NaNO3的重量份数为0.2 ,所述的KBrO3的重量份数为0.1 。
所述的(NH4)2SO4的重量份数为400 ,所述的NaCl的重量份数为3 ,所述的NaSO4的重量份数为25 ,所述的NaNO3的重量份数为0.3 ,所述的KBrO3的重量份数为0.2 。
所述的(NH4)2SO4的重量份数为350 ,所述的NaCl的重量份数为2.5 ,所述的NaSO4的重量份数为20,所述的NaNO3的重量份数为0.25 ,所述的KBrO3的重量份数为0.15 。
一种生物组织低温保护剂的制备方法,采用超纯水作为介质,第一步称取(NH4)2SO4的重量份数为300-400 ,加入600重量份数的超纯水中;第二步称取NaCL的重量份数为2-3 、NaSO4的重量份数为18-25 和NaNO3的重量份数为2-3 ,依次加入300重量份数的超纯水中;第三步称取KBrO3的重量份数为0.1-0.2 ,再加入100重量份数的超纯水中;将上述三步所得的三种试剂各用玻璃棒搅拌1min, 超声波超声20min;然后将第二步、第三步两种试剂依次缓慢加入第一步的试剂中,边加边用玻璃棒搅拌,最后用超声波在超声10min,倒入棕色玻璃瓶中,用4℃冰箱保存备用。
一种生物组织低温保护剂的使用方法,第一步生物标本组织切块,第二步将切好的生物标本在室温下用生物组织低温保护剂浸泡,使溶液渗入细胞制成样本,第三步将样本在温度为4℃放置6小时,第四步将样本移入-20℃或-86℃环境下进行长期保存。
有益效果:
1.本发明可迅速渗入组织进行细胞和遗传物质(DNA和RNA)的保护;保护液迅速的保护作用确保了生物标本用作科学研究的基因表达分析结果的准确性;样本能够长期保护,即使是多次反复冻融,遗传物质也不会降解;可对生物标本进行低温有效长期保藏。
2.本发明在低温环境中对标本进行保护,在细胞水平与分子水平一同来对生物标本进行保护,真正做到生物标本的有效保藏。
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