[发明专利]银线草醇D在制备抑制肝癌细胞克隆形成的药物中的应用

说明书

技术领域

本发明属于化工领域及医药领域，涉及银线草醇D在制备抗肝癌药物中的应用。

背景技术

原发性肝脏恶性肿瘤起源于肝脏的上皮或间叶组织，前者称为原发性肝癌，是我国高发的，危害极大的恶性肿瘤。继发性或称转移性肝癌系指全身多个器官起源的恶性肿瘤侵犯至肝脏。一般多见于胃、胆道、胰腺、结直肠、卵巢、子宫、肺、乳腺等器官恶性肿瘤的肝转移。

肝脏是人体最大的实质性器官，承担人体的各类重要代谢功能，因此，肝脏一旦出现恶性肿瘤将导致未及生命的严重后果。又由于肝脏具有丰富的血流供应，与人体的重要结构如下腔静脉、门静脉、胆道系统等关系密切；肝脏恶性肿瘤发病隐匿，侵袭性生长快速，其治疗甚为困难。

目前，治疗方法包括手术、肝动脉结扎、肝动脉化疗栓塞、射频、冷冻、激光、微波以及化疗和放射治疗等方法。生物治疗,中医中药治疗肝癌也多有应用。目前肝癌的治疗以手术为首，这是因为放疗和化疗的副作用。许多化疗药物对正常细胞也有杀伤作用，导致患者自身免疫系统在治疗过程中收到较大损伤。副作用较少的药物凤毛麟角，因此寻找新的候选化合物是肝癌预防和治疗的重要课题。

银线草为金粟兰科植物银线草(ChloranthusJaponicusSieb)的全草或根及根茎。倍半萜类化合物是金粟兰科植物中比较重要的一类化合物，在整个金粟兰科植物中均有分布，具有消炎解痉、抑制微生物等生物活性。银线草中得到半萜类化合物结构复杂其骨架可分为桉叶烷型、环桉烷型、吉马烷型、菖蒲烷型等数种类型，同时它们具有内酯、酮、醇、多聚体等多种形式。

银线草全株供药用，具有祛湿散寒、活血止痛、散瘀解毒之功效。民间验方有许多有关银线草的记载，如银线草外敷可治疗疮疖、疥癣、无名肿毒、蛇咬伤、乳腺炎等疾病。

Kawabata等1990年首次从银线草中分离出了1个由2个环桉型倍半萜内酯聚合而成的二聚体化合物，命名为银线草醇A(shizukaolA)，在1992年从银线草中分离得到了3个由2个环桉型倍半萜内酯聚合而成的二聚体化合物，命名为银线草醇B-D(shizukaolB-D)。

申请号为200910095051.6、申请日为20091013、名称为“乌药烷型二聚倍半萜类化合物,其制备方法及其在制药中的应用”的中国发明专利申请中详细阐述了银线草醇D的制备方法，并且表明银线草醇D能够明显增加L6细胞葡萄糖的消耗量，提示其能够促进胰岛素的作用，促进糖的摄取和转运。

银线草醇D，英文名为ShizukaolD，CASNo.：142279-42-3。银线草醇D是天然产物，生物利用度较高、性质较稳定,具有临床使用价值。随着人们对此类化合物的化学和生物学研究的深入,其分子作用机制将逐步明确,这将进一步推动此类化合物的化学结构修饰和构效关系研究,并有助于提高此类化合物的药用价值。

发明内容

本发明的目的是提供银线草醇D的新的药用用途。

本发明提供了银线草醇D在制备抗肝癌药物中的应用，尤其是银线草醇D在制备抑制肝癌细胞克隆形成的药物中的应用。

本发明中依据：通常，细胞克隆形成率即细胞接种存活率，表示接种细胞后贴壁的细胞成活并形成克隆的数量；贴壁后的细胞不一定每个都能增殖和形成克隆，而形成克隆的细胞必为贴壁和有增殖活力的细胞。克隆形成率反映细胞群体依赖性和增殖能力两个重要性状。

本发明所述的药物制成针剂或者片剂。

所述的肿瘤来源于smmc-7721、SK-hep1、HepG2、QGY、Hep3B或者FOCUS细胞。

本发明中,所述的抑制肝癌细胞克隆形成的药物可以是银线草醇D和其他治疗肝癌药物的组合物。例如,所述的其他治疗肝癌药物是索拉菲尼。

另一方面,将银线草醇D加入体外培养的肿瘤细胞的培养液中，够明显抑制肿瘤细胞的增殖和克隆形成。

其中,体外培养的肿瘤细胞的培养液中,加入的银线草醇D的药物浓度大于0且小于50μmol/L。

一般而言，加入银线草醇D的终浓度为1-100μM。例如，1-5μM，1-10μM，5-10μM，1-20μM，5-30μM，1-60μM，5-90μM，10-40μM，1-50μM，5-60μM，15-25μM，5-50μM，15-60μM，25-40μM，5-40μM，等等。较好的,银线草醇D的药物浓度小于20μmol/L。

本发明的一个实施例中采用的肝癌细胞是SMMC-7721细胞。

另一个实施例中采用的肝癌细胞是Focus细胞。