[发明专利]来源于海岛棉的抗黄萎病蛋白及其编码基因与应用

说明书

技术领域

本发明属于基因工程领域，涉及一种来源于海岛棉的抗黄萎病蛋白及其编码基因与应用。

背景技术

棉花属于锦葵目棉属，主要有四个栽培种：亚洲棉(粗绒棉)，非洲棉，陆地棉(细绒棉)，海岛棉(长绒棉)。据国际棉花委员会统计陆地棉和海岛棉的总产量分别占全世界棉花产量的95％和2％。

陆地棉因最早在美洲大陆种植而又被称作美棉，是世界上四大棉花栽培种中最重要的品种。陆地棉的特点是适应性广、产量高、纤维较长、品质较好，但是其对黄萎菌的抗病性差，目前多为感病或耐病品种。由于我国所种的棉花品种绝大多数是陆地棉(G.hirsutum)，所产原棉约99％为陆地棉，所以黄萎病对我国棉花产量的威胁非常严峻。当黄萎菌侵染陆地棉后，病株叶片上开始形成不规则黄色病斑并由下部叶片向上扩展，导致除主叶脉保持绿色外，整个叶片呈褐色掌状病斑，也被称为“西瓜皮”状斑。而更严重的落叶型症状则表现为多数或整株叶片萎蔫下垂，后变为褐色并向上卷曲，很快脱落。黄萎病一般在播种1个月以后会出现病株，黄萎病发病的最适温度为25℃至28℃。一般在现蕾期进入发病适宜阶段，病情迅速发展；到七八月份花铃期达到发病高峰棉花黄萎病的危害主要表现在中后期，病株叶片变黄、干枯脱落，结铃小、脱落率高。自1993年以来黄萎病对棉花的危害逐年加重，每年损失皮棉约7.5至10万吨。而海岛棉(Gossypium barbadense)虽然产量低，但是抗病性好，所以研究海岛棉的抗病机制对于我国棉花产业的长远发展具有重要意义。

发明内容

本发明的目的是提供一种来源于海岛棉的抗黄萎病蛋白及其编码基因与应用。

本发明所提供的蛋白，来源于海岛棉(Gossypium barbadense)，命名为GbAt11，具体为如下(a)或(b)：

(a)由序列表中序列1所示的氨基酸序列组成的蛋白质；

(b)将(a)所限定的蛋白质的氨基酸序列经过一个或几个氨基酸残基的取代和/或缺失和/或添加，且与植物抗黄萎病相关的蛋白质。

为了便于GbAt11蛋白的纯化，可在由序列表中序列1的氨基酸残基序列组成的蛋白质的氨基末端或羧基末端连接上如下表所示的标签。

表：标签的序列

Poly-Arg5-6(通常为5个)RRRRRPoly-His2-10(通常为6个)HHHHHHFLAG8DYKDDDDKStrep-tag II8WSHPQFEKc-myc10EQKLISEEDL

上述(b)中的蛋白质可人工合成，也可先合成其编码基因，再进行生物表达得到。上述(b)中的蛋白质的编码基因可通过将序列表中序列2所示的DNA序列中缺失一个或几个氨基酸残基的密码子，和/或进行一个或几个碱基对的错义突变。

所述蛋白质具体可为在序列1所示蛋白的羧基端连接flag标签后形成的融合蛋白。

编码所述蛋白质的核酸分子也属于本发明的保护范围。

所述核酸分子可以是DNA，如cDNA、基因组DNA或重组DNA；所述核酸分子也可以是RNA，如mRNA、hnRNA或tRNA等。