[发明专利]一种用液相色谱法分离富马酸二甲酯有关物质的方法

说明书

技术领域

本发明属于分析化学领域，具体涉及一种液相色谱法分离分析富马酸二甲酯及其有关物质的方法。

背景技术

富马酸二甲酯获批用于治疗复发-缓解型多发性硬化症，成为第三种用于治疗多发性硬化症（MS）疾病缓解的口服药物。富马酸二甲酯，化学名为(E)-2-丁烯二酸二甲酯，英文通用名为Dimethyl fumarate。分子式为C₆H₈O₄。富马酸二甲酯结构式为：

                                                 

在该化合物的生产过程中，有几个杂质可能会由于去除不完全而影响药物的纯度和质量，这几个杂质即药物质量控制中的有关物质，对于富马酸二甲酯的生产过程中主要控制的有关物质有4个，分别是原料富马酸（Fumaric acid）、杂质1：顺丁烯二酸单甲酯（Monomethyl maleate）、杂质2：顺丁烯二酸二甲酯（Dimethyl maleate）、杂质3：富马酸单甲酯（Monomethyl fumarate），结构式分别为

原料                        杂质-01                        杂质-02

 

杂质-03

对于富马酸二甲酯生产过程中引入的有关物质，在原料药中是需要进行质量控制的，因此，实现富马酸二甲酯及其有关物质的分离与分析，对富马酸二甲酯的质量控制具有重要的现实意义。

发明内容

本发明的目的在于提供一种分析富马酸二甲酯纯度以及分离其有关物质的方法，从而实现富马酸二甲酯与其有关物质的分离和测定，从而保证富马酸二甲酯的纯度，实现其终产品原料药的质量控制。

本发明所述的用液相色谱法分析富马酸二甲酯纯度以及分离其有关物质的方法，是采用以十八烷基硅烷键合硅胶为填料的水系色谱柱，以一定比例的无机酸-有机相为流动相。

本发明所述的色谱柱选自德国MN NUCLEODUR C18 Pyramid，优选为MN-C₁₈。

本发明所述的有机相选自以下化合物：甲醇、乙腈、丙醇、异丙醇，优选为甲醇或乙腈。

本发明所述的流动相无机酸-有机相采用等度洗脱。

本发明所述的无机酸选自磷酸、甲酸、乙酸，优选为磷酸。

上述所说的方法中，其中无机酸溶液中包含的无机酸的浓度为0.1～0.5%，优选浓度为0.1%。

本发明所述的分离测定方法，可按照以下方法实现：

1) 取富马酸二甲酯样品适量，用甲醇或流动相溶解样品，配制成每1mL含富马酸二甲酯及其中间体0.1～1.5mg，优选为0.5 mg/mL的样品溶液。

2) 设置流动相流速为0.5～1.5mL/min ，优选为1.0mL/min，检测波长为205～250nm，优选为205nm，柱温箱温度为20～50℃，优选为30℃。

3) 取（1）的样品溶液5～50μL，优选为5μL注入液相色谱仪，完成富马酸二甲酯与有关物质的分离测定。

本发明使用的仪器与最优色谱条件为：

高效液相色谱仪的型号，无特别要求，本发明采用的色谱仪为岛津：LC-20AT， CBM-20A，SIL-20AC，SPD-M20A，CTO-10ASvp

色谱柱：C₁₈（MN-pyramid，250×4.6 mm，5μm）

流动相： A：0.1%的磷酸水；B：乙腈；采用等度洗脱；A：B=90:10

流速：1.0mL/min

检测波长：205nm

柱温：30℃

进样体积：5μL。

本发明采用C₁₈（MN NUCLEODUR C18 Pyramid，250×4.6 mm，5μm），能够有效地分离富马酸二甲酯及其有关物质。本发明解决了富马酸二甲酯及其有关物质的分离与分析问题，从而确保了富马酸二甲酯原料药的质量可控。 

附图说明

图1为实施例1时富马酸二甲酯HPLC色谱图；

图2为实施例1时的富马酸二甲酯及其有关物质HPLC色谱图；

图3为实施例2时富马酸二甲酯HPLC色谱图；

图4为实施例2时的富马酸二甲酯及其有关物质HPLC色谱图；

图5为实施例3时的溶剂色谱图；