[发明专利]时空可调性抑制病理性靶细胞的系统

说明书

本发明涉及时空可调性抑制病理性靶细胞的系统，揭示了一种基于肿瘤特异性嵌合抗原受体(CAR)技术的技术方案，其中CAR免疫效应细胞仅在介导物质存在的条件下才能够靶向病理性靶细胞，实现CAR免疫效应细胞的持续扩增并发挥对肿瘤细胞的杀伤作用；而在介导物质不存在的条件下，CAR免疫效应细胞不发挥作用。本发明为避免CAR免疫效应细胞在体内持续扩增和对自身正常组织的交叉反应产生毒性作用提供了解决方案。

技术领域

本发明涉及肿瘤免疫学领域，更具体地，涉及到时空可调性抑制病理性靶细胞的系统。

背景技术

随着肿瘤免疫学理论和技术的发展，免疫治疗在肿瘤治疗中的作用日益受到重视。T淋巴细胞在肿瘤免疫应答中起主要作用，近年来发展的利用基因改造技术表达肿瘤特异性嵌合抗原受体(Chimeric antigen receptor，CAR)的免疫效应细胞显示出的靶向性、杀伤活性和持久性，为过继性细胞免疫治疗注入了新的解决方案。CAR是将识别肿瘤相关抗原(TAA)的单链抗体(scFv)或抗体片段和T细胞或NK细胞的活化序列在体外进行基因重组，形成重组质粒，在体外通过转染技术，转染经纯化与大规模扩增后的T细胞或NK细胞，称之为CAR T细胞或CAR NK细胞。CAR主要包含TAA特异性抗体的抗原结合部(细胞外域)以及T细胞协同刺激结构(CD137和CD28)和信号传导结构(CD3ζ细胞内域)。

研究所展示的CAR T细胞在体内的扩增、持续活性、转化为记忆细胞以及其抗肿瘤效果都非常出众。但是，其毒性作用不可忽视。在一些肿瘤中，CAR T细胞识别自身正常组织表达靶抗原或者激活本身的T细胞诱导自身免疫反应，持续活化的T细胞和记忆T细胞可能会构成实质性危害，例如由于交叉反应所致器官靶向毒性等。

因此，本领域迫切需要研究化解CAR T细胞的毒性作用、但能有效甚至高效杀伤肿瘤细胞的方法。

发明内容

本发明的目的在于提供一种时空可调性抑制病理性靶细胞的系统。

在本发明的第一方面，提供用于抑制病理性靶细胞的系统，其中包括：

(1)融合蛋白，包括多肽标签和特异性识别病理性靶细胞的结合分子；和

(2)嵌合抗原受体(CAR)免疫效应细胞，其表达特异性识别所述多肽标签的结合分子(包括识别所述多肽标签的抗体或配体等)。

在一个优选例中，所述的多肽标签为具有低免疫原性(包括无免疫原性)的无关抗原，其在非肿瘤组织中低表达或不表达。

在另一优选例中，所述的多肽标签是内源或外源的多肽。

在另一优选例中，所述的多肽标签选自但不限于：WTE，E-tag，Flag，Myc，His6等。

在另一优选例中，所述的多肽标签是WTE标签。

在另一优选例中，所述的多肽标签是SEQ ID NO:38所示核苷酸序列编码的多肽。

在另一优选例中，所述的多肽标签可以融合在所述特异性识别病理性靶细胞的结合分子的N端或C端，也可以同时融合在抗体的N端和C端。

在另一优选例中，所述的病理性靶细胞是肿瘤细胞，所述的特异性识别病理性靶细胞的结合分子结合于肿瘤细胞上的肿瘤相关抗原。

在另一优选例中，所述的肿瘤相关抗原选自(但不限于)：

EGFR，EGFRvIII，de4EGFR，EpCAM，CD19，CD20，CD33，HER2，EphA2，IL13R，GD2，LMP1，Claudin18.A2，PLAC1，NY-ESO-1，MAGE4，MUC1，MUC16，LeY，CEA，GPC3，Mesothelin，CAIX(碳酸酐酶IX)，CD123，IL13R，EphA2。