[发明专利]一种耐温型产谷氨酸菌株的选育方法在审
| 申请号： | 201410290119.7 | 申请日： | 2014-06-24 |
| 公开（公告）号： | CN105219761A | 公开（公告）日： | 2016-01-06 |
| 发明（设计）人： | 吴坚 | 申请（专利权）人： | 上海冠生园天厨调味品有限公司 |
| 主分类号： | C12N15/03 | 分类号： | C12N15/03;C12N15/01;C12N13/00;C12N1/21;C12R1/15;C12R1/13 |
| 代理公司： | 上海弼兴律师事务所 31283 | 代理人： | 胡美强 |
| 地址： | 201707 上海*** | 国省代码： | 上海;31 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 一种 耐温 谷氨酸 菌株 选育 方法 | ||
1.一种耐温型产谷氨酸菌株的选育方法，其特征在于：其包括如下步骤：
(1)采用传统菌种选育技术对原始出发菌株的原生质体进行诱变处理，筛选得到耐温性增强且谷氨酸产酸能力提升的正突变株；
(2)采用浓度为1～2g/L的溶菌酶对菌株酶解3～5h，得到谷氨酸生产菌原生质体；
(3)采用UV照射25～30min，55～60℃加热灭活谷氨酸生产菌原生质体；
(4)采用浓度为35wt％聚乙二醇6000诱导谷氨酸生产菌原生质体融合25～35min；
(5)通过对原始出发菌株多母本原生质体递进融合，结合发酵稳定性测试选育得到耐温型谷氨酸生产菌。
2.如权利要求1所述的耐温型产谷氨酸菌株的选育方法，其特征在于：所述的原始出发菌株为谷氨酸棒杆菌和/或黄色短杆菌。
3.如权利要求1所述的耐温型产谷氨酸菌株的选育方法，其特征在于：所述的诱变处理采用下述步骤：对处于对数生长中前期、菌龄为4～6h的菌体进行UV照射5～10min，浓度为1.0～2.0％的硫酸二乙酯处理20～40min，X射线照射25～45min为诱变方法进行原生质体诱变，所述的百分比为体积百分比。
4.如权利要求1所述的耐温型产谷氨酸菌株的选育方法，其特征在于：所述的筛选为耐42℃高温筛选、显色平板筛选和38℃高温摇瓶筛选。
5.如权利要求1所述的耐温型产谷氨酸菌株的选育方法，其特征在于：所述的正突变株为耐温性增强且在38℃温度下谷氨酸产量有相对提高的菌株。
6.如权利要求1所述的耐温型产谷氨酸菌株的选育方法，其特征在于：所述的聚乙二醇6000诱导谷氨酸生产菌原生质体融合的时间为25～35min。
7.一种由权利要求1～6中任意一项所述的选育方法得到的耐温型产谷氨酸菌株。
8.如权利要求7所述的耐温型产谷氨酸菌株，其特征在于：所述的耐温型谷氨酸生产菌的最适发酵温度为36～41℃，初始谷氨酸的平均产量>50g/L。
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