[发明专利]一种核酸片段及其用途

说明书

技术领域

本发明涉及一种核酸片段及其用途。

背景技术

自20世纪70年代末开始，乳腺癌的发病在全球范围内一直位居女性肿瘤的首位，我国虽不是乳腺癌的高发国家，但发病率却呈逐年上升的趋势。根据雌激素受体(ER)表达情况，乳腺癌可分为雌激素受体依赖性乳腺癌和非激素受体依赖性乳腺癌。雌激素受体依赖性乳腺癌表达雌激素受体，并依赖雌激素生长，对激素敏感、抗性弱，可以采用抗雌激素药物治疗，而非激素受体依赖性乳腺癌不表达雌激素受体，不依赖雌激素生长，对激素的敏感性差、抗性强，不能采用抗雌激素药物治疗。据研究，约70％的乳腺癌为雌激素受体依赖性乳腺癌，因此，检测乳腺癌组织中的雌激素受体表达情况，确定乳腺癌是否为雌激素受体依赖性乳腺癌，对治疗和预后具有重要意义。

子宫内膜癌是妇科常见的恶性肿瘤，发病率仅次于子宫颈癌。根据雌激素受体表达情况，子宫内膜癌可分为雌激素受体依赖性子宫内膜癌和非激素受体依赖性子宫内膜癌。雌激素受体依赖性子宫内膜癌的预后较好，而非激素受体依赖性子宫内膜癌的预后较差。据研究，约80％的子宫内膜癌为雌激素受体依赖性子宫内膜癌，因此，检测子宫内膜癌组织中的雌激素受体表达情况，确定乳腺癌是否为雌激素受体依赖性子宫内膜癌，对治疗和预后具有重要意义。

现有的雌激素受体检测方法通常采用雌激素和雌激素受体抗体进行检测，其中，雌激素因分子量太小，不能用于免疫组化检测乳腺癌和子宫内膜癌组织，难以有效定位，雌激素受体抗体可以用于免疫组化检测，但是抗体生产是一个耗费时间的复杂过程，而且需要动物养殖和/或细胞培养的设施。因此，急需一种更容易和更少代价的方法来对乳腺癌中ER进行检测。

雌激素依赖性乳腺癌的治疗方式众多，包括外科治疗、化学治疗、放射治疗和中医中药治疗，其中，抗雌激素药物是最重要的治疗药物之一，其可以通过消除雌激素与雌激素受体的相互作用促使癌细胞凋亡，包括雌激素受体拮抗剂例如它莫西芬，芳香化酶抑制剂如依西美坦等。它莫西芬是目前最为常见的雌激素依赖性乳腺癌治疗药物，它通过竞争性结合雌激素受体，抑制雌激素与雌激素受体结合，治疗乳腺癌。然而，使用它莫西芬存在严重的耐药性，因而需要开发新的抗雌激素药物。

发明内容

为了解决上述问题，本发明涉及一种核苷酸序列及其用途，具体涉及一种能够与雌激素受体特异性结合的核酸适体，及其在制备诊断乳腺癌和/或子宫内膜癌的试剂中的用途和制备雌激素受体拮抗剂中的用途。

本发明公开的的核苷酸序列如SEQ ID NO.1所示。

所述核酸片段是雌激素受体的核酸适体(Aptamer)(即ER-Aptamer)，对雌激素受体有高亲和力。

核酸适体(aptamer)指的是经体外筛选技术SELEX(指数富集配体系统进化)筛选出的能特异结合蛋白质或其他小分子物质的核酸片段。

本发明还提供了所述核酸片段在制备诊断表达雌激素受体的组织和/或细胞的试剂中的用途。优选地，所述诊断表达雌激素受体的组织和/或细胞的试剂是诊断雌激素受体依赖性乳腺癌或雌激素受体依赖性子宫内膜癌的试剂。

雌激素受体依赖性乳腺癌，是指表达雌激素受体的乳腺癌。

雌激素受体依赖性子宫内膜癌，是指表达雌激素受体的子宫内膜癌。

一种诊断表达雌激素受体的组织和/或细胞的试剂，它是含有标记物的权利要求1所述的核酸片段，所述标记物为生物素、辣根过氧化酶、碱性磷酸酶、地高辛或荧光素。

一种检测乳腺癌和/或子宫内膜癌的试剂盒，包括前述诊断试剂。

优选地，它包括生物素标记的核苷酸序列如SEQ ID NO.1所示的核酸片段、链亲和素-辣根过氧化物酶和DAB溶液；

或者，它包括辣根过氧化酶标记的核苷酸序列如SEQ ID NO.1所示的核酸片段和DAB溶液。

DAB溶液，即二氨基联苯胺溶液。

所述的核苷酸序列在制备雌激素受体拮抗剂中的用途。

所述雌激素受体拮抗剂是治疗雌激素受体依赖性乳腺癌的药物。

雌激素受体拮抗剂，是指竞争性结合雌激素受体，抑制雌激素与雌激素受体结合的物质。

本发明核苷酸序列如SEQ ID NO.1所示的ER-核酸适体，与ER分子的亲和力与雌激素相当，且其分子量大，可以用于免疫组化检测表达雌激素受体的组织和/或细胞，如乳腺癌和子宫内膜癌，同时，其还是一种雌激素受体拮抗剂，可以有效抑制乳腺癌细胞的增殖，是一种新的乳腺癌的治疗药物，同时，本发明核酸片段的制备方法简单，成本低廉。