[发明专利]药用盾叶薯蓣组培一步成苗批量化生产的方法

权利要求书

1.药用盾叶薯蓣组培一步成苗批量化生产的方法，其特征在于，包括以下步骤：

(1)基础苗获得：选择优良药用盾叶薯蓣植株的茎段和顶芽为外植体，外植体消毒后在MS大量+B5微量+MS有机+2×MS铁盐+6-BA2.0～4.0mg/L+KT0.2～0.8mg/L+多效唑2.0～8.0mg/L+矮壮素2.0～5.0mg/L+IAA0.2～0.8mg/L+NAA0.2～0.8mg/L琼脂固体培养基上，同步诱导出带芽的愈伤组织；

(2)一步成苗批量化生产：将步骤(1)获得的带芽愈伤组织块分成小块，接在MS大量+B5微量+MS有机+MS铁盐+6-BA0.2～2.0mg/L+KT0.2～0.8mg/L+多效唑0.5～5.0mg/L+矮壮素2.0～4.0mg/L+IAA0.2～0.8mg/L+NAA0.2～0.8mg/L的琼脂固体培养基上进行增殖和生根；

(3)试管苗移栽：试管苗出瓶移栽前，将根叶俱全的丛生幼苗分成单株，出瓶的幼苗先用500～800倍的多菌灵或代森锰锌浸泡10～15分钟，随后将幼苗移至有顶玻璃的移栽容器中，在温度为20～30℃，湿度80～90％的条件下生长，25～30d长出新叶时，既已成活；

(4)大田块茎繁育：将移栽成活的幼苗，在自然条件炼苗3～5d后，移栽至大田进行块茎繁育。

2.根据权利要求1所述的药用盾叶薯蓣组培一步成苗批量化生产的方法，其特征在于，步骤(1)中将外植体剪成含有1节1芽的规格，首先用洗衣粉清洗干净，在无菌操作台上用无菌水洗5～7次，用70％酒精浸润30秒-1分钟，再放入0.1％的升汞溶液中灭菌12～18分钟，无菌水冲洗5～6次，备用。

3.根据权利要求1所述的药用盾叶薯蓣组培一步成苗批量化生产的方法，其特征在于，步骤(1)和(2)的培养温度为24℃±2，1000～2000lx弱光环境中，每天10～12小时光照培养。

4.根据权利要求1所述的药用盾叶薯蓣组培一步成苗批量化生产的方法，其特征在于，步骤(1)诱导出的芽继代培养时，去老茎留新芽，新芽茎段或顶芽再分成1节1芽转入相同的诱导培养基中，每隔25～30d继代一次。

5.根据权利要求1所述的药用盾叶薯蓣组培一步成苗批量化生产的方法，其特征在于，步骤(2)是将愈伤组织块按0.5～1cm×0.5～1cm的规格分成小块。

6.根据权利要求1所述的药用盾叶薯蓣组培一步成苗批量化生产的方法，其特征在于，步骤(2)培养时每隔25～30d继代一次。

7.根据权利要求1所述的药用盾叶薯蓣组培一步成苗批量化生产的方法，其特征在于，步骤(1)使用的培养基：MS大量+B5微量+MS有机+2×MS铁盐+6-BA2.0mg/L+KT0.4mg/L+多效唑4.0mg/L+矮壮素2.0mg/L+IAA0.2mg/L+NAA0.4mg/L。

8.根据权利要求1所述的药用盾叶薯蓣组培一步成苗批量化生产的方法，其特征在于，步骤(1)使用的培养基：MS大量+B5微量+MS有机+2×MS铁盐+6-BA3.0mg/L+KT0.4mg/L+多效唑4.0mg/L+矮壮素2.0mg/L+IAA0.4mg/L+NAA0.4mg/L；

9.根据权利要求1所述的药用盾叶薯蓣组培一步成苗批量化生产的方法，其特征在于，步骤(2)使用的培养基：MS大量+B5微量+MS有机+MS铁盐+6-BA0.5mg/L+KT0.2mg/L+多效唑2.0mg/L+矮壮素2.0mg/L+IAA0.2mg/L+NAA0.2mg/L。

10.根据权利要求1所述的药用盾叶薯蓣组培一步成苗批量化生产的方法，其特征在于，步骤(2)使用的培养基：MS大量+B5微量+MS有机+MS铁盐+6-BA0.8mg/L+KT0.5mg/L+多效唑2.0mg/L+矮壮素3.0mg/L+IAA0.2mg/L+NAA0.2mg/L。