[发明专利]从桦褐孔菌中提取制备桦褐孔菌多糖的方法

权利要求书

1.从桦褐孔菌中提取制备桦褐孔菌多糖的方法，其特征是，包括如下步骤：A．原料的脱脂预处理；B．热水浸提制备粗多糖；C．粗多糖酶解；D．大孔吸附树脂DM301处理；E．超滤去除小分子；F．真空冷冻干燥；制备桦褐孔菌多糖。

2.根据权利要求1所述的方法，其特征是，步骤A．原料的脱脂预处理是指，取干燥的桦褐孔菌菌核，粉碎，置于4-8倍体积的60-95%乙醇溶液中浸泡16-24 h（优选的，置于6-7倍体积的70-90%乙醇溶液中浸泡18-20 h，更加优选的，置于6.5倍体积的80%乙醇溶液中浸泡20 h），以除去脂肪、部分单（寡）糖及脂溶性色素，残渣阴凉处风干。

3.根据权利要求1所述的方法，其特征是，步骤B．热水浸提制备粗多糖是指，预处理后的残渣风干后，加10-20倍蒸馏水（v/w），沸水提取1-3 h， 80-120目纱布过滤（优选的，加13-18倍蒸馏水（v/w），沸水提取1.5-2.5h， 85-100目纱布过滤，更加优选的，加15倍蒸馏水（v/w），沸水提取2 h，100目纱布过滤），滤渣重复提取1-3次，合并滤液，浓缩，离心，喷雾干燥得粗多糖。

4.根据权利要求1所述的方法，其特征是，步骤C．粗多糖酶解是指，将粗多糖加水溶解，加入木瓜蛋白酶，35-45℃反应20-40 min（优选的，36-42℃反应25-35 min，更加优选的，40℃反应30 min），得粗多糖的酶解液。

5.根据权利要求4所述的方法，其特征是，粗多糖加水溶解后配制为0.5-2.0%（w/w）的水溶液（优选的，配制为0.6-1.8%（w/w）的水溶液，更加优选的，配制为1.5%（w/w）的水溶液）。

6.根据权利要求4所述的方法，其特征是，木瓜蛋白酶加入量为粗多糖水溶液的3-5%（w/w）（优选的，加入量为粗多糖水溶液的3.5-4.5%（w/w），更加优选的，加入量为粗多糖水溶液的4.0%（w/w））。

7.根据权利要求1所述的方法，其特征是，步骤D．大孔吸附树脂DM301处理是指，粗多糖的酶解液加入预处理好的DM301树脂层析柱中，按照DM301树脂︰粗多糖酶解液=1.2-2.0︰1（w/v），流速控制在1.5-2.2 ml/min（优选的，按照DM301树脂︰粗多糖酶解液=1.5-1.8︰1（w/v），流速控制在1.5-2 ml/min，更加优选的，按照DM301树脂︰粗多糖酶解液=1.6︰1（w/v），流速控制在1.8 ml/min），收集流出液。

8.根据权利要求7所述的方法，其特征是，所述的预处理是指，大孔吸附树脂DM301用无水乙醇浸泡24 h，并以无水乙醇洗脱至无色，然后用水洗至无醇味。

9.根据权利要求1所述的方法，其特征是，步骤E．超滤去除小分子是指，采用超滤膜分子量为1万的中空纤维素膜进行超滤，去除1万以下的小分子物质，得桦褐孔菌多糖样品。

10.根据权利要求1所述的方法，其特征是，步骤F.真空冷冻干燥是指，先将桦褐孔菌多糖样品放置于-20℃下3 h，然后转入-80℃下冷冻6 h以上，然后转入真空冷冻干燥机干燥，得精制的桦褐孔菌多糖。