[发明专利]棉花植物事件aC20-3以及用于其检测的引物和方法有效
申请号: | 201410287577.5 | 申请日: | 2014-06-25 |
公开(公告)号: | CN105296501B | 公开(公告)日: | 2020-01-31 |
发明(设计)人: | 王建胜;何云蔚;崔洪志 | 申请(专利权)人: | 创世纪种业有限公司 |
主分类号: | C12N15/29 | 分类号: | C12N15/29;C12N15/63;C12N1/21;C12N15/11;C12Q1/6895;A01H5/00;A01H6/60 |
代理公司: | 11285 北京北翔知识产权代理有限公司 | 代理人: | 屈静 |
地址: | 518117 广东省深圳市龙岗区坪地*** | 国省代码: | 广东;44 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 棉花 植物 事件 ac20 以及 用于 检测 引物 方法 | ||
1.外源插入DNA序列和特定棉花基因组DNA序列的接合体,其序列如SEQ ID No:21所示,其由第1118-6544bp的T-DNA插入序列、第1-1117bp的上游侧翼棉花基因组序列和第6545-7386bp的下游侧翼棉花基因组序列构成。
2.一种核酸构建体,其包含序列SEQ ID No:21。
3.一种重组载体,其包含权利要求1所述的T-DNA插入序列或权利要求2所述的核酸构建体。
4.一种重组细胞,含有权利要求1所述的T-DNA插入序列或权利要求2所述的核酸构建体或权利要求3所述的载体,所述重组细胞为重组农杆菌细胞。
5.用于检测权利要求1所述的外源插入DNA序列和特定棉花基因组DNA序列的接合体的引物对,其由特异性识别权利要求1所述的T-DNA插入序列或上游侧翼棉花基因组序列的第一引物和特异性识别权利要求1所述的T-DNA插入序列或下游侧翼棉花基因组序列的第二引物组成,
所述第一引物选自SEQ ID NO:22或23,所述第二引物为SEQ ID NO:14;或者
所述第一引物为SEQ ID NO:18,所述第二引物为SEQ ID NO:24。
6.一种鉴定棉花生物样品中权利要求1所述的外源插入DNA序列和特定棉花基因组DNA序列的接合体的方法,其包括:(a)从待鉴定的棉花生物样品提取DNA样品;
(b)以提取的DNA样品为模板,使用权利要求5所述的引物对进行PCR扩增;
(c)检测PCR扩增产物,如果扩增产物长度与SEQ ID NO:21上所述PCR引物对的序列之间的长度一致,则表明棉花生物样品中所述外源插入DNA序列和特定棉花基因组DNA序列的接合体的存在。
7.一种制备转基因棉花的方法,培养含有权利要求1所述的外源插入DNA序列和特定棉花基因组DNA序列的接合体的棉花种子或其他组织。
8.权利要求1所述的外源插入DNA序列和特定棉花基因组DNA序列的接合体、权利要求2所述的核酸构建体、权利要求3所述的重组载体、权利要求4所述的重组细胞、权利要求6或权利要求7所述的方法用于提高棉花纤维品质、进行植物育种以及用作分子标记的用途。
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