[发明专利]一种固定化的洋葱伯克霍尔德菌脂肪酶及其制备方法有效
| 申请号: | 201410282597.3 | 申请日: | 2014-06-23 |
| 公开(公告)号: | CN104109662B | 公开(公告)日: | 2017-03-01 |
| 发明(设计)人: | 闫云君;柯彩霞;李相;徐莉;张后今 | 申请(专利权)人: | 华中科技大学 |
| 主分类号: | C12N11/14 | 分类号: | C12N11/14;C12R1/01 |
| 代理公司: | 华中科技大学专利中心42201 | 代理人: | 梁鹏 |
| 地址: | 430074 湖北*** | 国省代码: | 湖北;42 |
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| 摘要: | |||
| 搜索关键词: | 一种 固定 洋葱 霍尔 脂肪酶 及其 制备 方法 | ||
1.一种固定化的洋葱伯克霍尔德菌脂肪酶,其特征在于,包括碳纳米管基质和洋葱伯克霍尔德菌脂肪酶,所述洋葱伯克霍尔德菌脂肪酶通过亲和吸附和/或共价结合的方式结合在碳纳米管基质的开放端口、表面和内壁。
2.如权利要求1所述的固定化的洋葱伯克霍尔德菌脂肪酶,其特征在于,所述碳纳米管基质为经硫酸超声处理的碳纳米管。
3.如权利要求1或2所述的固定化的洋葱伯克霍尔德菌脂肪酶的制备方法,其特征在于,包括以下步骤:
(1)硫酸超声处理碳纳米管:将每克碳纳米管与100ml至300ml的浓硫酸均匀混合,200W至250W超声处理2小时至5小时,洗涤并过滤后干燥,研磨得到硫酸超声处理的碳纳米管;
(2)制备碳纳米管与洋葱伯克霍尔德菌脂肪酶混合液:将步骤(1)中获得的硫酸超声处理的碳纳米管加入到洋葱伯克霍尔德菌脂肪酶溶液中,使得所述碳纳米管与洋葱伯克霍尔德菌脂肪酶的质量比例在1:0.5至1:6之间,形成碳纳米管与洋葱伯克霍尔德菌脂肪酶混合液;
(3)制备固定化的洋葱伯克霍尔德菌脂肪酶:将步骤(2)中获得的碳纳米管与洋葱伯克霍尔德菌脂肪酶混合液在4℃至60℃下,振荡反应1小时至6小时,离心去掉上清液获得所述固定化的洋葱伯克霍尔德菌脂肪酶。
4.如权利要求3所述的制备方法,其特征在于,还包括步骤:
(4)制备固定化的洋葱伯克霍尔德菌脂肪酶干粉:将步骤(3)中获得的固定化的洋葱伯克霍尔德菌脂肪酶,冷冻干燥,研磨成粉状。
5.如权利要求3所述的制备方法,其特征在于,步骤(1)过滤时采用醋酸纤维作为滤膜。
6.如权利要求3所述的制备方法,其特征在于,步骤(2)所述洋葱伯克霍尔德菌脂肪酶溶液,其pH值在5.0至8.0之间。
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