[发明专利]一种融合蛋白及其疫苗组合物的制备与应用

权利要求书

1.一种融合蛋白，所述融合蛋白由：

(1)假单胞杆菌外毒素A结构域I，

(2)假单胞杆菌外毒素A结构域II，

(3)高致病性猪繁殖与呼吸综合征抗原性蛋白，以及

(4)羧基末端部分组成；

所述高致病性猪繁殖与呼吸综合征抗原性蛋白包括Nsp9蛋白、Nsp10蛋白，所述Nsp9蛋白为SEQ ID No.1所示的蛋白，所述Nsp10蛋白为SEQ ID No.2所示的蛋白；

所述羧基末端部分为含有氨基酸序列KDEL的多肽，其氨基酸序列为SEQ ID NO.3、SEQ ID NO.4、SEQ ID NO.5、SEQ ID NO.6或SEQ ID NO.7；

所述高致病性猪繁殖与呼吸综合征抗原性蛋白位于假单胞菌外毒素A结构域II与羧基末端部分之间，且假单胞杆菌外毒素A结构域II位于假单胞杆菌外毒素A结构域I与所述高致病性猪繁殖与呼吸综合征抗原性蛋白之间。

2.一种制备如权利要求1所述融合蛋白的方法，其特征在于，所述方法包括：通过基因工程手段，依次构建所述融合蛋白的克隆载体、表达载体，并对所述融合蛋白进行表达、纯化及鉴定。

3.一种高致病性猪繁殖与呼吸综合征疫苗组合物，其特征在于，所述疫苗组合物包括免疫量的如权利要求1-2任一项所述融合蛋白以及兽医学上可接受的佐剂，所述融合蛋白含量为50-200μg/ml。

4.根据权利要求3所述疫苗组合物，其特征在于，所述佐剂为铝胶佐剂、皂苷、油包水乳剂、水包油乳剂、水包油包水乳剂、丙烯酸或甲基丙烯酸的聚合物、顺丁烯二酸酐和链烯基(alkenyl)衍生物的共聚物、RIBI佐剂系统、Block co-polymer、SAF-M、单磷酰脂质A、Avridine脂质-胺佐剂、大肠杆菌不耐热肠毒素、霍乱毒素、IMS 1314、胞壁酰二肽或Gel佐剂中的一种或几种。

5.根据权利要求4所述疫苗组合物，其特征在于，所述佐剂为Gel佐剂。

6.根据权利要求3-5任一项所述疫苗组合物，其特征在于，所述疫苗组合物还包括其他抗原，所述其他抗原包括猪圆环病毒抗原、副猪嗜血杆菌抗原、猪细小病毒抗原、大叶性肺炎放线杆菌抗原、大肠杆菌抗原、猪萎缩性鼻炎抗原、猪伪狂犬病病毒抗原、猪霍乱病原抗原、猪流感病毒抗原中的一种或多种。

7.根据权利要求6所述疫苗组合物，其特征在于，所述其他抗原为猪圆环病毒抗原。

8.权利要求3-7任一项所述疫苗组合物在制备预防和/或治疗高致病性猪繁殖与呼吸综合征的药物中的应用。