[发明专利]一种抗抗坏血酸和色素干扰的4-羟基丁酸检测试纸的制备方法

说明书

技术领域

本发明属于检测4-羟基丁酸试纸的制备领域，特别涉及一种抗抗坏血酸和色素干扰的4-羟基丁酸检测试纸的制备方法。

背景技术

GHB全名Gamma-Hydroxybutyrate(伽马-羟基丁酸及其钠盐)是一种麻醉药品。60年代初医学上利用GHB作为麻醉剂，后来发现GHB的不良副作用，便停止使用，只利用作为安眠药之用。90年代不法分子开始使用GHB作为娱乐，犯罪之用。GHB是白色粉状，溶于水后无色，液体状称为G水。GHB无气味，味微咸。GHB的服后反应跟酒精相似。小剂量会令人放松、个人防线放开、精神赳振及有类似轻微喝醉的兴奋感觉。中份量会令人头昏眼花、眼睛不能对准焦点、心情愉悦、能投入音乐、跳舞及谈话。没有时间观念，及不停点头。服用过量(OD)会令人无意识地不停点头或陷入无意识状态，极度眩晕，没有方向感及呕吐。严重过量会中毒，中毒者会全无意识、身体抽搐，呕吐及吸呼严重下降。于服用后10-20分钟会开始有反应，主要药效反应可维持1-3小时，剩余反应约会维持2-4小时甚至更久。如果GHB混合其他药物或酒精，很容易会导致服用者“OD”，更甚者更会昏迷及死亡。

由于GHB为无色无味的药物，而且会混合水来服用，因此服用者根本没有可能知道自己所服用的份量为多少，亦因为这个原因所以很容易会发生服用过量的意外。就算是轻度的服用过量亦会令服用者失去意识甚至进入昏迷，或死亡。GHB确是一种非常危险的毒品。就2000年1月美国所发表的报告，单在1月份美国已有60个服用GHB后死亡的个案，由此可以知道它的危险性。不论在生理或心理上GHB都会令使用者上瘾的。

由于其上述特性，不法分子用它来作为迷幻药，迷奸青年女性，抢劫财物，被害人清醒后难以回忆起之前发生的一切。社会危害很大。《Reliable,Sensitive,Rapid and Quantitative Enzyme-Based Assay for Gamma-Hydroxybutyric Acid(GHB)》(Dawn T.Bravo等著)中介绍了GHB脱氢酶的制备及检测ghb的试纸的制备，但是，该方法存在一些严重的问题：试纸只能冷藏保存，常温状态不稳定；GHB脱氢酶和抗坏血酸有交叉反应，使存在抗坏血酸的样品产生假阳性反应，得出错误结果；很多饮料本身有颜色，会干扰检测结果。而本发明涉及一种抗抗坏血酸和色素干扰的4-羟基丁酸的检测装置制备方法，解决了这些问题。本发明的出现解决了上述问题，使检测结果更准确可靠。

发明内容

本发明所要解决的技术问题是提供一种抗抗坏血酸和色素干扰的4-羟基丁酸检测试纸的制备方法，该方法可以抗检测液中的色素，维生素C等的影响，能够常温保存，专一性和灵敏度好。可以用于预防约会强奸，迷奸，及警方侦破案件时现场筛查鉴定。

本发明的一种抗抗坏血酸和色素干扰的4-羟基丁酸检测试纸的制备方法，包括：

(1)滤纸在第一相浸液中浸润后，在30-50℃热风干燥，得到酶试剂层；

(2)滤纸在第二相浸液中浸润后，在30-50℃热风干燥，得到显色剂层；

(3)将海绵棒在抗抗坏血酸浸润液中浸润，40-60℃热风烘干，得到抗抗坏血酸海绵棒；

(4)依次将显色剂层、酶试剂层切割成的试纸块，压在上盖显色孔下，抗抗坏血酸海绵棒一端上，得到抗抗坏血酸和色素干扰的4-羟基丁酸检测试纸，其中显色剂层在上，酶试剂层在下。

所述步骤(1)中滤纸为滤纸whatman23sl。

所述步骤(1)中第一相浸液配制过程具体为：每配制总体积为100ml的浸液，在pH＝8.8-10.8，浓度为40mmol/L-80mmol/L Tris-盐酸缓冲液中，分别溶入稳定剂和保护剂0.1-10g，NAD⁺辅酶I0.1-2.0g，黄递酶200-20000iu，4-羟基丁酸脱氢酶2000-100000iu。

所述稳定剂和保护剂为天然或人工聚合高分子胶体。

所述聚合高分子胶体为肝素、右旋糖酐，海藻糖、PEG10000、牛血清蛋白中的一种或几种。所述步骤(2)中滤纸为whatman593。

所述步骤(2)中第二相浸液为：每100ml溶剂中溶入0.1-0.5g氯化硝基四氮唑蓝。

所述溶剂为甲醇或乙醇。

所述步骤(3)中抗抗坏血酸浸润液为：每配制100ml的浸润液，在pH＝8.8-10.8，浓度为40mmol/L-80mmol/L Tris-盐酸缓冲液中溶入抗坏血酸氧化酶20-50mg，2,6-二氯酚靛酚钠50-200mg。