[发明专利]一种放射线照射模式筛选鼻咽癌放疗抵抗细胞的方法在审
申请号: | 201410274855.3 | 申请日: | 2014-06-19 |
公开(公告)号: | CN104017799A | 公开(公告)日: | 2014-09-03 |
发明(设计)人: | 邱元正;刘勇;李果;粟忠武;任舒灵;田勇泉 | 申请(专利权)人: | 中南大学湘雅医院 |
主分类号: | C12N13/00 | 分类号: | C12N13/00;C12N5/09 |
代理公司: | 长沙星耀专利事务所 43205 | 代理人: | 宁星耀;许伯严 |
地址: | 410008 湖*** | 国省代码: | 湖南;43 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 放射线 照射 模式 筛选 鼻咽癌 放疗 抵抗 细胞 方法 | ||
1.一种放射线照射模式筛选鼻咽癌放疗抵抗细胞的方法,其特征在于,采用放射线梯度递增的筛选模式。
2.一种如权利要求1所述的放射线照射模式筛选鼻咽癌放疗抵抗细胞的方法,其特征在于,具体包括以下步骤:
(1)将指数生长期鼻咽癌细胞株胰酶消化后,稀释至500-1000个细胞/ml;
(2)稀释后细胞加入培养瓶或培养皿中,置于37℃,5%CO2,饱和湿度,无菌条件下培养6-12小时,使细胞处于贴壁但不增殖或少量增殖状态;
(3)进行放射照射:每个放疗剂量要求重复一次或以上;初次为2Gy初始剂量;放疗剂量增加量在原来基础上增加1-2Gy,若细胞不能耐受增加后的放射剂量,则维持之前的原放射剂量,直至放射线总剂量≥60Gy;
(4)经过步骤(3)照射后,继续在37℃,5%CO2饱和湿度的培养皿内培养至融合度达到50%以上,并通过胰酶消化传代;待稳定传代2~3次后,进行放射线抵抗能力检测,通过2 Gy辐射量的细胞存活率判断细胞敏感性。
3.根据权利要求1或2所述的放射线照射模式筛选鼻咽癌放疗抵抗细胞的方法,其特征在于,所述鼻咽癌放疗抵抗细胞为进行体外培养的鼻咽癌细胞株。
4.根据权利要求1或2所述的放射线照射模式筛选鼻咽癌放疗抵抗细胞的方法,其特征在于,所述放疗射线为X射线。
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