[发明专利]小花棘豆黄酮的制备方法及应用

权利要求书

1.小花棘豆黄酮的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：

(1)小花棘豆黄酮的分离：取小花棘豆地上部分，阴干、粉碎、过20目筛后备用；采用超临界CO₂提取法，称取适量小花棘豆粉末和2倍质量的硅藻土，装柱，两端用适量的脱脂棉以防止柱子堵塞，扭紧提取池，以防止气体泄露，将提取池放于加热恒温箱中接通整个提取管道，保证整个提取系统不存在漏气；设定温度、压力、夹带剂流速、CO₂流速的参数，参数稳定后进行提取；提取液经旋转蒸发仪浓缩，冷冻干燥仪干燥，得到棕黄色粉末；

(2)超临界CO₂提取法的优化：设置提取温度范围为30℃、35℃、40℃、45℃、50℃、55℃、60℃和65℃；提取压力范围为10MPa、15MPa、20MPa、25MPa和30MPa；设置提取时间范围为0.5h、1.0h、1.5h、2.0h、2.5h、3.0h、3.5h、4.0h、4.5h和5.0h；设置夹带剂浓度为10％、20％、30％、40％、50％、60％、70％、80％、90％和100％；设置夹带剂流速为0.1mL/min、0.2mL/min、0.3mL/min、0.4mL/min和0.5mL/min；设置CO₂流速为0.5mL/min、1.0mL/min、1.5mL/min、2.0mL/min和2.5mL/min；根据Central Composite中心组合试验设计原理，整个试验过程以小花棘豆黄酮提取率为响应值，得到最佳提取工艺为：提取温度45℃，提取压力20MPa，提取时间2.0h，夹带剂为乙醇，夹带剂浓度80％，夹带剂流速0.4mL/min，CO₂流速1.5mL/min；

(3)小花棘豆黄酮含量的测定：采用HPLC法；色谱柱为C₁₈、2.1*150mm，1.8μm，流动相为乙腈和水，柱温30℃，流速1.0mL/min，检测波长为360nn，检测标准品槲皮素，进样量1μL；采用梯度洗脱：0min，乙腈∶水＝10％∶90％；1min，乙腈∶水＝10％∶90％；3min，乙腈∶水＝20％∶80％；6min，乙腈∶水＝45％∶55％；8min，乙腈∶水＝75％∶25％；结果表明小花棘豆黄酮提取率为18.84mg/g。

2.一种权利要求1所述小花棘豆黄酮在制备绵羊饲料添加剂中的应用。

3.根据权利要求2所述小花棘豆黄酮在制备绵羊饲料添加剂中的应用，其特征在于，将小花棘豆黄酮按照10-50mg/kg的比例添加入绵羊饲料中；将小花棘豆黄酮添加入绵羊饲料是通过制备活性成分预混物来实现；这种预混物含有1-10％小花棘豆黄酮和90％-89％的吸附载体；然后，将预混物与维生素、酶、矿物质、蛋白组分、糖类组分、脂肪组分混合，制备成含有0.5-5％小花棘豆黄酮的饲料添加剂；之后将该饲料添加剂按1-5％添加到饲料中。