[发明专利]血栓靶向释放RGDF的抗栓剂聚天冬酰-RGDF的合成和应用

说明书

本发明涉及血栓靶向释放RGDF的聚天冬酰‑RGDF，涉及它的制备方法，涉及它在大鼠血栓模型上的靶向抗血栓作用。因而本发明阐明了聚天冬酰‑RGDF作为靶向抗血栓剂的临床应用前景。本发明属于生物医药领域。

发明领域

本发明涉及血栓靶向释放RGDF的聚天冬酰-RGDF，涉及它的制备方法，涉及它在大鼠血栓模型上的靶向抗血栓作用。因而本发明阐明了聚天冬酰-RGDF作为靶向抗血栓剂的临床应用前景。本发明属于生物医药领域。

背景技术

血小板血栓是血栓形成的起始阶段，可以分为血小板粘附、活化和聚集三个过程。在血小板血栓形成过程中，血小板膜上GPIIb/IIIa活化，构象发生改变，然后在Ca²⁺的参与下，与纤维蛋白原或vWF上的RGD四肽序列特异性结合将血小板和红血球偶联起来，形成血栓。在血小板聚集过程中，纤维蛋白原或vWF上的RGDF与活化的血小板表面受体GP IIb/IIIa结合起至关重要的作用。RGDF与被GP IIb/IIIa识别并竞争性抑制纤维蛋白原或vWF与血小板结合，抑制血小板聚集。血栓形成部位富集了活化的血小板，这些血小板是血栓形成的重要构件。如果能把RGDF定向释放到血栓形成部位，就可以使这些活化的血小板不能参与血栓形成，从而有效地抑制血栓形成。可是，这个目标在本发明申请之前没有达到。根据这些认识，发明人提出了本发明。本发明的突出创造性在于用聚天冬酰-RGDF将RGDF输送到血栓形成部位，然后在血栓中有效地释放RGDF，发挥靶向抗血栓作用。

发明内容

本发明的第一个内容是采用常规的液相合成，逐步接肽制备HCl·Arg(Tos)-Gly-Asp(OBzl)-Phe-OBzl。

本发明的第二个内容是采用标准方法，制备平均分子量为20964，链长为173个天冬氨酸残基的聚天冬氨酸。

本发明的第三个内容是采用EDC法将HCl·Arg(Tos)-Gly-Asp(OBzl)-Phe-OBzl偶联到聚天冬氨酸的羧基上然后脱去RGDF的侧链和羧端保护基，制备聚天冬酰-RGDF。

本发明的第四个内容是测定聚天冬酰-RGDF的抗血小板聚集活性。

本发明的第五个内容是测定聚天冬酰-RGDF的抗血栓活性。

本发明的第六个内容是测定聚天冬酰-RGDF对GPIIb/IIIa的影响。

本发明的第七个内容是测定聚天冬酰-RGDF在血栓中释放RGDF。

本发明中所出现的缩略语的说明：

RGDF Arg-Gly-Asp-Phe

PD 聚天冬氨酸

聚天冬酰-RGDF 聚天冬酰-Arg-Gly-Asp-Phe

THF 四氢呋喃

DCC 二环己基酰亚胺

DCU 二环己基脲

OBzl 苄氧基

Boc 叔丁氧羰基

Tos 对甲苯磺酸基

OMe 甲氧基

HOBt N-羟基苯并三唑