[发明专利]一种地黄多糖的制备方法

说明书

技术领域

本发明天然药物领域，特别涉及一种用酶解法和乙醇沉淀从地黄中提取地黄多糖的方法。

背景技术

地黄为玄参科植物地黄的干燥根茎。生地黄具有滋阴清热作用，熟地黄具有补血滋阴、益精填髓的功效，是优良的滋阴补血药，被誉为“壮水之主，补血之君”，广泛用于阴虚、血虚所致的各种疾病。地黄多糖是地黄中的有效成分之一。

许多植物多糖具有免疫促进作用。抗肿瘤作用，抗衰老活性，降血糖活性，抗病毒活性，以及降血脂活性等。而且多糖因其特殊的生物活性和无毒副作用而被广泛用于临床用药、疫苗和保健食品。多糖作为提高机体免疫功能的保健品已被广泛开发，但许多多糖产品仅仅停留在保健品阶段，未能开发成药物，主要原因是多糖的分离纯化困难，技术不过关。

如CN101402691A公开了一种用醇沉淀和氯化钙脱蛋白制备熟地黄多糖的方法，包括如下步骤：将熟地黄加8倍体积重量的水，在98～100℃浸提4H，过滤，药渣再加8倍原药物体积重量的水在98～100℃浸提4H，挤尽药渣水分，过滤，合并滤液，浓缩至相当于原药材0.5G/ML，加乙醇搅拌使含醇量达80％，缓加快搅，醇沉24h，抽滤，用4倍药材体积重量的95％乙醇洗涤沉淀，挥至无醇味，加水溶解至药材体积重量的2倍，调PH至8～9，加入无水氯化钙，使W/V达7％，溶解，放置室温，离心，取上清液浓缩至稠膏，95℃减压干燥即得。但该方法的脱蛋白效率仅为50％左右，熟地黄多糖保存率70％左右，距离工业生产的要求仍有一定距离。

CN101041675A公开了一种地黄提取地黄寡糖、地黄多糖的方法,是将地里收获的鲜地黄用清水洗净、磨碎或干地黄水浸1～10小时后磨碎，用离心机高速离心得地黄滤液和地黄渣，而后将滤液通过50000D(道尔顿)超滤膜、10000D超滤膜、1000D钠滤膜、500D钠滤膜的多级分离，将10000D超滤膜分离后的膜上液用真空蒸发器加热浓缩至含糖量10～50％，冷却后加1～9倍乙醇搅拌0.1～1小时，过滤弃液，滤渣在100℃以下烘干可得地黄多糖成品，将500D钠滤膜分离后的膜上液用真空蒸发器浓缩至含糖量10～50％，喷雾干燥可得含水苏糖≥80％地黄寡糖成品。该方法的地黄多糖的提取率仍然较低且工艺复杂。

发明内容

为解决上述问题，本发明的目的在于提供一种高效率、高纯度的地黄多糖的制备方法。

为达上述目的，本发明采用如下技术方案：

一种地黄多糖的制备方法，包括如下步骤：

(1)将地黄粉碎；

(2)在粉碎的地黄中加入水、纤维素酶，调节pH，搅拌，加热下酶解；

(3)酶解后进行分离，取滤液；

(4)在滤液中加入乙醇溶液并用碱调节溶液的pH沉淀多糖，收集沉淀；

(5)对收集的沉淀进行干燥，得到地黄多糖产品。

作为优选技术方案，本发明所述的制备方法，步骤(2)加入的水的质量为地黄粉末质量的3-15倍，例如为5倍、9倍、13倍等，优选为6-8倍，纤维素酶的含量3-6％，例如为3.3％、3.9％、4.5％、5.2％、5.8％等，纤维素酶的含量为纤维素酶占加入纤维素酶后的混合物总量的比例。

作为优选技术方案，本发明所述的制备方法，步骤(2)中的pH为2-7，例如为2.5、3.4、4.1、4.9、5.2、5.8、6.6等，优选为4-5。

作为优选技术方案，本发明所述的制备方法，步骤(2)中酶解的温度为30-70℃，例如为33℃、39℃、45℃、53℃、61℃、69℃等，优选为40-60℃；酶解的时间为1h以上，例如为1.5h、2.3h、2.9h、4.0h、5.5h、6.6h等，优选为2h。

本发明的分离可以不作具体限定，只要能达到有效分离的方法均可用于本发明。但是作为优选技术方案，本发明所述的制备方法，步骤(3)所述的分离采用离心分离。

优选的离心的条件为：离心的转速为5000g，离心的时间为30min。

作为优选技术方案，本发明所述的制备方法，步骤(4)中乙醇溶液的质量浓度为70％以上，例如为75％、81％、85％、89％、92％、96％等，优选为85-95％；pH为7.5以上，优选为8-9。

作为优选技术方案，本发明所述的制备方法，步骤(4)中的碱为可挥发性碱性盐，优选为碳酸氢铵。

作为优选技术方案，本发明所述的制备方法，步骤(5)中的干燥通过减压蒸馏进行。