[发明专利]一种从积雪草中提取积雪草苷的方法

说明书

技术领域

本发明涉及一种积雪草中提取积雪草苷的方法，具体涉及一种复合酶发酵协同双频超声波提取积雪草苷的方法，属于天然植物提取产物技术领域。

背景技术

积雪草为伞形科植物的干燥全草，其性含，味苦、辛，具有清热利湿，解毒消肿之功效，主要用于湿热黄疸、中暑腹泻、砂淋、血淋、痈肿疮毒、跌扑损伤等症。其主要成分为积雪草苷和羟基积雪草苷等三萜皂苷类成分，具有促进伤口愈合，刺激肉芽生长，促进表皮角质化，并有助于形成新的结缔组织，对烧伤增生性癜痕有明显疗效。

酶工程技术，通过选用恰当的酶制剂，如纤维素酶、果胶酶、蛋白酶等与植物细胞作用，破坏细胞壁的致密结构，引起细胞壁及细胞质间结构产生局部疏松、膨胀、崩溃等变化，减小细胞壁、细胞质等传质屏障对有效成分从细胞内向提取介质扩散的传质阻力，从传质角度促使有效成分的提取率提高。

双频超声法是一门新兴的技术，双频超声同时辐射，能显著地增加空化效果，减少驻波所造成的死角，在低温下即可得到高的提取率，为热不稳定物质的提取提供了一种新的强化方法。经文献检索，未见与本发明相同的的公开文献报道。

发明内容

本发明的目的在于提供一种工艺简单、得率高、提取时间短且安全可靠的从积雪草中提积雪草苷的方法。

本发明包括以下步骤：

积雪草粉碎，过80目筛，将相当于积雪草粉末1~2%的复合酶喷洒其上，薄膜包裹，堆积在温度35~45℃的暗室内，发酵15~24h，发酵后的原料加入5~8倍的50~60%的乙醇，置于双频超声提取器中，超声频率分别为40KHz、80KHz，功率为400~600W，于50~60℃提取60~90min，过滤，浓缩，石油醚-水萃取，取下层，上氧化铝柱，10~15BV的50~70%的乙醇洗脱，洗脱液浓缩，甲醇重结晶2次，得到积雪草苷。

本发明所述的复合酶为纤维素酶、半纤维素酶、果胶酶按重量比0.5:0.3:0.2的混合物。

本发明所述的超声功率为双频超声作用时总功率（40KHz与80KHz各取一半）。

本发明的有益效果在于：（1）采用复合酶处理，能破坏植物的细胞壁，有利于有效成分的溶出，大大缩短处理时间，提高生产效率；（2）采用双频超声萃取，利用超声的空化作用，减少驻波所造成的死角，加速积雪草苷的溶出；（3）本发明操作方便，工艺简单，得率高，且生产安全可靠。

下面将结合具体实施方式进一步说明本发明，但本发明要求保护的范围并不局限于下列实施方式。

具体实施方式：

实施例1：

积雪草粉碎，过80目筛，取1kg粉末，将相当于积雪草粉末1%的复合酶（纤维素酶、半纤维素酶、果胶酶的重量比为0.5:0.3:0.2）喷洒其上，薄膜包裹，堆积在温度35℃的暗室内，发酵24h，发酵后的原料加入8倍的50%的乙醇，置于双频超声提取器中，超声频率分别为40KHz、80KHz，功率为400W，于60℃提取60min，过滤，浓缩，石油醚-水萃取，取下层，上氧化铝柱，10BV的50%的乙醇洗脱，洗脱液浓缩，甲醇重结晶2次，得到积雪草苷10.2g，纯度为90.5%，得率为1.02%。

实施例2：

积雪草粉碎，过80目筛，取1kg粉末，将相当于积雪草粉末1.5%的复合酶（纤维素酶、半纤维素酶、果胶酶的重量比为0.5:0.3:0.2）喷洒其上，薄膜包裹，堆积在温度40℃的暗室内，发酵20h，发酵后的原料加入6倍的60%的乙醇，置于双频超声提取器中，超声频率分别为40KHz、80KHz，功率为600W，于55℃提取80min，过滤，浓缩，石油醚-水萃取，取下层，上氧化铝柱，12BV的60%的乙醇洗脱，洗脱液浓缩，甲醇重结晶2次，得到积雪草苷12.2g，纯度为94.1%，得率为1.22%。

实施例3：

积雪草粉碎，过80目筛，取1kg粉末，将相当于积雪草粉末2%的复合酶（纤维素酶、半纤维素酶、果胶酶的重量比为0.5:0.3:0.2）喷洒其上，薄膜包裹，堆积在温度45℃的暗室内，发酵15h，发酵后的原料加入5倍的55%的乙醇，置于双频超声提取器中，超声频率分别为40KHz、80KHz，功率为500W，于50℃提取90min，过滤，浓缩，石油醚-水萃取，取下层，上氧化铝柱，15BV的70%的乙醇洗脱，洗脱液浓缩，甲醇重结晶2次，得到积雪草苷12.4g，纯度为93.6%，得率为1.24%。