[发明专利]一种闭花木苷的制备方法

说明书

技术领域

本发明属于天然药物化学领域，特别涉及一种闭花木苷的制备方法。

背景技术

闭花木苷属于木脂素苷，CAS号25047-48-7，分子式C₂₈H₂₈O₁₁，分子量540.5，分子结构式如下：

 

闭花木苷有显著提高嗜中性粒性白细胞数目的作用，能对抗药物引起的粒细胞的减少，能对抗苯引起的大鼠白细胞减少，能提高嗜中性粒细胞数。

通过文献检索，现有闭花木苷制备方法的公开多采用薄层法分离，由于操作复杂，制备量较小，样品得率低，不利于大生产制备。

发明内容

本发明的目的是解决现有技术的不足和缺陷，提供一种操作简便的闭花木苷的制备方法。

为了实现上述目的，本发明采用以下技术方案：

一种闭花木苷的制备方法，其特征在于：取闭花木叶原料粉碎，加入5-10倍量50%-99%甲醇溶液超声提取2-3次，提取液加入活性炭回流脱色，滤出活性炭浓缩后加入大孔树脂柱中吸附，先用3-9倍量20%-50%甲醇溶液洗脱，再用5-10倍柱体积50%-90%甲醇溶液洗脱，洗脱液浓缩后用乙酸乙酯溶液萃取，收集萃取液回收试剂用高速逆流色谱仪分离，紫外检测器在线监测，收集流分减压干燥即得。

所述的大孔树脂可选HZ816、HPD100、AB-8和D101中的一种。

所述的高速逆流色谱仪分离条件为：取石油醚、乙酸乙酯、甲醇、水，按1-3:3-5:4-7:2-5混合，取上相做固定相、下相为流动相，主机转速700-1000rpm，流速为1-3mL/min。

采用本法制备闭花木苷，工艺步骤简便易操作，制备量大，而且低污染，适合工业化生产。

下面将结合具体实施方式进一步说明本发明，但本发明要求保护的范围并不局限于下列实施方式。

具体实施方式

实施例1：

取闭花木叶粉碎，称10kg，用100L90%甲醇溶液超声提取30分钟，提取2次，提取液加入100g活性炭回流脱色，滤出活性炭，减压浓缩至无醇加入HZ816大孔树脂柱中吸附，用4倍柱体积30%甲醇溶液洗脱，再用7倍柱体积70%甲醇溶液洗脱，洗脱液减压浓缩至1000ml，加入乙酸乙酯溶液萃取5次，萃取液回收试剂，得浸膏。取石油醚、乙酸乙酯、甲醇、水，按1:3:4:2混合，充分分层后，取上相注满高速逆流色谱管做固定相，开转主机，转速850rpm，同时泵入下相做流定相，建立动态平衡后，流速调节为2ml/min，用流动相溶解浸膏，由进样阀进样，紫外检测器在线监测，收集目标成分，连续制备，流分回收试剂，得闭花木苷3.2g，经HPLC检测，含量98.8%。

实施例2：

取闭花木叶粉碎，称10kg，用80L70%甲醇溶液超声提取30分钟，提取3次，提取液加入200g活性炭回流脱色，滤出活性炭，减压浓缩至无醇加入HPD100大孔树脂柱中吸附，用9倍柱体积20%甲醇溶液洗脱，再用8倍柱体积60%甲醇溶液洗脱，洗脱液减压浓缩至800ml，加入乙酸乙酯溶液萃取3次，萃取液回收试剂，得浸膏。取石油醚、乙酸乙酯、甲醇、水，按2:4:5:2混合，充分分层后，取上相注满高速逆流色谱管做固定相，开转主机，转速800rpm，同时泵入下相做流定相，建立动态平衡后，流速调节为3ml/min，用流动相溶解浸膏，由进样阀进样，紫外检测器在线监测，收集目标成分，连续制备，流分回收试剂，得闭花木苷3.6g，经HPLC检测，含量98.1%。

实施例3：

取闭花木叶粉碎，称10kg，用100L50%甲醇溶液超声提取30分钟，提取3次，提取液加入150g活性炭回流脱色，滤出活性炭减压浓缩无醇加入AB-8大孔树脂柱中吸附，用6倍柱体积40%甲醇溶液洗脱，再用9倍柱体积65%甲醇溶液洗脱，洗脱液减压浓缩至900ml，加入乙酸乙酯溶液萃取4次，萃取液回收试剂，得浸膏。取石油醚、乙酸乙酯、甲醇、水，按2:5:6:3混合，充分分层后，取上相注满高速逆流色谱管做固定相，开转主机，转速750rpm，同时泵入下相做流定相，建立动态平衡后，流速调节为2ml/min，用流动相溶解浸膏，由进样阀进样，紫外检测器在线监测，收集目标成分，连续制备，流分回收试剂，得闭花木苷3.7g，经HPLC检测，含量97.8%。

实施例4：

取闭花木叶粉碎，称10kg，用80L80%甲醇溶液超声提取30分钟，提取3次，提取液加入200g活性炭回流脱色，滤出活性炭减压浓缩无醇加入D101大孔树脂柱中吸附，用5倍柱体积30%甲醇溶液洗脱，再用10倍柱体积70%甲醇溶液洗脱，洗脱液减压浓缩至1000ml，加入乙酸乙酯溶液萃取3次，萃取液回收试剂，得浸膏。取石油醚、乙酸乙酯、甲醇、水，按2:4:7:4混合，充分分层后，取上相注满高速逆流色谱管做固定相，开转主机，转速900rpm，同时泵入下相做流定相，建立动态平衡后，流速调节为3ml/min，用流动相溶解浸膏，由进样阀进样，紫外检测器在线监测，收集目标成分，连续制备，流分回收试剂，得闭花木苷2.9g，经HPLC检测，含量97.9%。