[发明专利]DNA甲基转移酶3α基因位点分型检测方法及检测试剂盒

权利要求书

1.一种DNA甲基转移酶3α基因位点分型检测方法，其特征在于，该方法包括如下步骤：

以基因组DNA为模板进行PCR扩增，得到PCR的扩增产物；

对PCR的扩增产物进行LDR扩增，得到LDR的扩增产物；

对LDR的扩增产物进行分析，判断各耐药位点的基因型。

2.根据权利要求1所述的DNA甲基转移酶3α基因位点分型检测方法，其特征在于，所述PCR扩增时的引物为一对正向引物和反向引物。

3.根据权利要求2所述的DNA甲基转移酶3α基因位点分型检测方法，其特征在于，所述正向引物序列为：5’-TCCTGCTGTGTGGTTAGACG-3’；

所述反向引物序列为：5’-CCATGTCCCTTACACACACG-3’。

4.根据权利要求1所述的DNA甲基转移酶3α基因位点分型检测方法，其特征在于，所述LDR扩增时采用的探针为荧光标记探针和检测探针。

5.根据权利要求4所述的DNA甲基转移酶3α基因位点分型检测方法，其特征在于，所述荧光标记探针的荧光基团为5-FAM、6-FAM、TAMRA、HEX、TET、JOE、VIC、NED、ROX、D1、D2、D3或D4。

6.一种DNA甲基转移酶3α基因位点分型检测试剂盒，其特征在于，所述检测试剂盒由如下三部分组成：PCR试剂、LDR试剂和标准品。

7.根据权利要求6所述的DNA甲基转移酶3α基因位点分型检测试剂盒，其特征在于，所述PCR试剂包含一对正向引物和反向引物、双蒸水、聚合酶、聚合酶配套缓冲液、dNTP与镁离子，

其中，聚合酶为Taq酶，镁离子由MgCl₂提供。

8.根据权利要求6所述的DNA甲基转移酶3α基因位点分型检测试剂盒，其特征在于，所述LDR试剂包含相关位点的荧光探针、双蒸水、Taq连接酶和连接酶配套缓冲液。

9. 根据权利要求6所述的DNA甲基转移酶3α基因位点分型检测试剂盒，其特征在于，所述标准品为野生型质粒DNA。

10.根据权利要求7所述的DNA甲基转移酶3α基因位点分型检测试剂盒，其特征在于，所述正向引物序列为：5’-TCCTGCTGTGTGGTTAGACG-3’；所述反向引物序列为：5’-CCATGTCCCTTACACACACG-3’。