[发明专利]一种硝化细菌及其培养方法在审
申请号: | 201410263301.3 | 申请日: | 2014-06-15 |
公开(公告)号: | CN104004690A | 公开(公告)日: | 2014-08-27 |
发明(设计)人: | 梁运祥;吴定心;周闯;赵述淼 | 申请(专利权)人: | 华中农业大学 |
主分类号: | C12N1/20 | 分类号: | C12N1/20;C12R1/01 |
代理公司: | 武汉凌达知识产权事务所(特殊普通合伙) 42221 | 代理人: | 宋国荣 |
地址: | 430070 湖*** | 国省代码: | 湖北;42 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 硝化细菌 及其 培养 方法 | ||
1.一种硝化细菌,其特征在于,分类命名为欧洲亚硝化单胞菌 AT7 (Nitrosomonas europaea AT7),保藏日期为: 2014年5月14日,保藏单位为:中国典型培养物保藏中心(CCTCC),地址:武汉市武昌珞珈山武汉大学,保藏中心保藏编号为:CCTCC NO: M 2014202;所述欧洲亚硝化单胞菌AT7形态及16Sr RNA 基因特征包括:菌体扫描电镜呈椭圆形, 长0.8~1.2um,宽0.4~0.6um;所述欧洲亚硝化单胞菌 AT7 的16S rRNA 基因序列包含与Seq NO:1 序列相似性大于98%的序列。
2.根据权利要求1所述的硝化细菌,其特征在于,该硝化细菌pH适应范围为pH=6.5~8.5;对氨氮耐受范围为0.1~800mg/L。
3.一种权利要求1所述的硝化细菌培养方法,其特征在于:硝化细菌分类命名为欧洲亚硝化单胞菌 AT7 (Nitrosomonas europaea AT7),硝化细菌培养方法包括下述步骤:
A、准备硝化细菌基础培养基;
B、配制含有悬浮填料的硝化细菌培养基:
1)在硝化细菌基础培养基中添加能悬浮的固体吸附物,用于促进硝化细菌的附着、悬浮生长;
2)在硝化细菌基础培养基中添加混合金属盐促进剂,用于促进硝化细菌生长;
C、接种硝化细菌:将硝化细菌以v/v 计,按5%~20%接种到B步骤配制的硝化细菌培养基中;
D、培养:对C步骤接种的硝化细菌进行培养,在培养过程中添加碳酸钠溶液调节pH 7.5~8.0,控温28~35℃,并连续曝气或间歇曝气,当培养基中氨氮消耗完后,最后得到经培养的硝化细菌。
4.根据权利要求3所述的硝化细菌培养方法,其特征在于,基础培养基中添加的固体吸附物的量是基础培养基重量的0.1%~2%;固体吸附物粒径小于74μm,密度为0.98~1.02cm3/g。
5.根据权利要求3所述的硝化细菌培养方法,其特征在于,所述固体吸附物选自秸秆粉、木屑粉、玉米芯粉、聚己内酯,为其中的一种或两种或两种以上的混合物;所述秸秆粉为水稻的秸秆、和/或小麦的秸秆、和/或玉米的秸秆制成的粉状物。
6.根据权利要求3所述硝化细菌培养方法,其特征在于,基础培养基中添加的混合金属盐促进剂的量为0.5~10mL/L。
7.根据权利要求3所述硝化细菌培养方法,其特征在于,混合金属盐促进剂的主要组分及浓度以w/v计为:
浓度为0.1%~1%的有MnCl2·4H2O; Na2B4O7·10H2O;ZnSO4·7H2O;EDTA-Fe;
浓度为0.01%~0.1%的有CuSO4·5H2O;VOSO4·5H2O;CoSO4·7H2O ;NiSO4·6H2O;Na2MoO4·2H2O。
8.根据权利要求3所述硝化细菌培养方法,其特征在于,所述硝化细菌基础培养基主要组分和重量为: 0.5~2 g/L (NH4)2 SO4; 0.3 g/L NaCl; 0.03 g/L FeSO4·7H20; 0.03 g/L MgSO4·7H20; 0.265g/L NaH2PO4 2H20; 6.55g/L Na2HPO4 12H20。
9.根据权利要求3所述硝化细菌培养方法,其特征在于,所述间接曝气为每曝气2~4h,静止1~2h。
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