[发明专利]一种制备特立帕肽的方法

权利要求书

1.一种制备特立帕肽的方法，提供了一种纯度高、成本低，适合规模化生产的特立帕肽制备工艺，此工艺既有效控制Met⁸(O)-特立帕肽含量又不影响特立帕肽的总收率，其特征在于，所述方法包括以下步骤：

步骤1，在活化剂系统的存在下，由树脂固相载体和Fmoc-Phe-OH偶联得到Fmoc-Phe-树脂；

步骤2，通过固相合成法，按特立帕肽主链肽序依次偶联具有N端Fmoc保护且侧链保护的氨基酸，其中肽序16-17位氨基酸采用假脯氨酸二肽Fmoc-Asn(Trt)-Ser(ψ Me, Me Pro)-OH代替原16-17位置两个氨基酸进行偶联；

步骤3，肽树脂裂解采用含NH₄I/Me₂S的TFA体系的裂解液，粗品经HPLC纯化、冻干得到特立帕肽，其工艺杂质Met⁸(O)-特立帕肽含量小于0.1 %。

2.根据权利要求1所述的方法，其特征是：

其中，步骤1所述的固相合成方法，所述树脂固相载体采用2-CTC树脂，所述活化剂系统选自DIEA、TMP或NMM，所述Fmoc-Phe-树脂为0.40~0.90mmol/g取代度的Fmoc-Phe-CTC树脂。

3.根据权利要求1所述的方法，其特征是：

其中，步骤1所述的固相合成方法，所述树脂固相载体采用王树脂，所述活化剂系统由DIC、HOBt和DMAP组成，所述Fmoc-Phe-树脂为0.40~0.90mmol/g取代度的Fmoc-Phe-王树脂。

4.根据权利要求1所述的方法，其特征在是：

其中，步骤2所述的固相合成方法，1）采用由体积比为1:4的哌啶和DMF组成的去保护液脱除Fmoc-Phe-树脂上的Fmoc保护基，得到H-Phe-树脂；

2）在偶联剂系统的存在下，H-Phe-树脂和Fmoc保护且侧链保护的精氨酸偶联得到Fmoc-Asn(Trt)- Phe-树脂；

3）重复步骤1）、2），按照特立帕肽主链肽序依次进行氨基酸的偶联，肽序16-17位氨基酸采用假脯氨酸二肽Fmoc-Asn(Trt)-Ser(ψ Me, Me Pro)-OH代替原16-17位置两个氨基酸进行偶联。

5.根据权利要求1所述的方法，其特征是：

其中，步骤3所述采用了含NH₄I/Me₂S的TFA体系的裂解液，其TFA体系的裂解液为：TFA、苯甲硫醚、苯甲醚、乙二硫醇、三异丙基硅烷、水、二甲硫醚、碘化铵一种或多种的组合。

6.根据权利要求4所述的方法，其特征是：

所述偶联剂系统包括缩合剂和反应溶剂，所述缩合剂选自DIC/HOBt、PyBOP/HOBt/DIEA或HATU/HOBt/DIEA；所述反应溶剂选自DMF、DCM、NMP、DMSO或他们之间的任意组合。