[发明专利]一种植物组织培养中外植体消毒的方法无效
| 申请号: | 201410262451.2 | 申请日: | 2014-06-12 |
| 公开(公告)号: | CN104106466A | 公开(公告)日: | 2014-10-22 |
| 发明(设计)人: | 张本厚;胡燕花;陈集双;朱笑扣 | 申请(专利权)人: | 南京工业大学大丰海洋产业研究院 |
| 主分类号: | A01H4/00 | 分类号: | A01H4/00 |
| 代理公司: | 无锡互维知识产权代理有限公司 32236 | 代理人: | 王爱伟 |
| 地址: | 224100 江苏省盐城市*** | 国省代码: | 江苏;32 |
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| 摘要: | |||
| 搜索关键词: | 一种 植物 组织培养 中外 消毒 方法 | ||
技术领域
本发明涉及植物组织培养技术领域,尤其涉及一种植物组织培养中外植体消毒的方法。
背景技术
植物组织培养用的外植体大部分取自田间,表面上附着大量的微生物,这是组织培养的一大障碍。因此在材料接种培养前必须要消毒处理,消毒一方面要求把材料表面上的各种微生物杀灭,同时又不能损伤或只轻微损伤组织材料而不影响其生长。因此,外植体的消毒处理是植物组织培养工作中的重要一环。
现有的消毒方法,消毒效果不好,材料上的微生物不能最大限度的被杀死,并且,现有的消毒方法,外植体易受到损害,大大降低了植物组织培养的成活率。
发明内容
本部分的目的在于概述本发明的实施例的一些方面以及简要介绍一些较佳实施例。在本部分以及本申请的说明书摘要和发明名称中可能会做些简化或省略以避免使本部分、说明书摘要和发明名称的目的模糊,而这种简化或省略不能用于限制本发明的范围。
鉴于上述和/或现有植物组织培养中外植体消毒方法中存在的问题,提出了本发明。
因此,本发明其中目的是提供一种植物组织培养中外植体消毒的方法,该消毒方法,其消毒容易、消毒效果好,毒性小,不易损伤材料,绿色环保。
为解决上述技术问题,根据本发明的一个方面,本发明提供了如下技术方案:一种植物组织培养中外植体消毒的方法,使用洗洁精和青霉素对材料预处理,然后再采用消毒剂对材料进行处理。
作为本发明一个优选的实施例,所述消毒液为酒精和次氯酸钠溶液。
作为本发明一个优选的实施例,其具体包括如下步骤:
步骤一:采用0.1~0.5%的洗洁精溶液浸泡材料5~15min,自来水冲洗20~40min;
步骤二:采用含有1~5%青霉素的自来水浸泡4~8min,自来水冲洗5~10min;
步骤三:对步骤一和步骤二预处理后的材料采用70~80%的酒精浸泡10~30s,无菌水清洗2~4次;
步骤四:采用5~10%次氯酸钠浸泡5~20min,无菌水清洗4~7次。
作为本发明一个优选的实施例,所述步骤一中,采用0.3%的洗洁精溶液浸泡材料10min。
作为本发明一个优选的实施例,所述步骤一中,采用自来水冲洗30min。
作为本发明一个优选的实施例,所述步骤二中,采用含有3%青霉素的自来水浸泡6min,自来水冲洗7min。
作为本发明一个优选的实施例,步骤三:采用75%的酒精浸泡材料10s,无菌水清洗3次。
作为本发明一个优选的实施例,采用7%次氯酸钠浸泡10min,无菌水清洗6次。
本发明提供了一种植物组织培养中外植体消毒的方法,其杀菌容易、杀菌效果好,毒性小,不易损伤材料,绿色环保。
具体实施方式
为使本发明的上述目的、特征和优点能够更加明显易懂,下面对本发明的具体实施方式做详细的说明。
在下面的描述中阐述了很多具体细节以便于充分理解本发明,但是本发明还可以采用其他不同于在此描述的其它方式来实施,本领域技术人员可以在不违背本发明内涵的情况下做类似推广,因此本发明不受下面公开的具体实施例的限制。
本发明提供了一种植物组织培养中外植体消毒的方法,使用洗洁精和青霉素对材料预处理,然后再采用消毒剂对材料进行处理。
以下采用实施例来详细说明本发明的实施方式,借此对本发明如何应用技术手段来解决技术问题,并达成技术效果的实现过程能充分理解并据以实施。
实施例1
将外植体材料切成小段或小块或片状或丝状,然后按以下步骤进行消毒:
步骤一:采用0.1%的洗洁精溶液浸泡材料15min,自来水冲洗20min;
步骤二:采用含有1%青霉素的自来水浸泡8min,自来水冲洗5min,完成预处理;
步骤三:对步骤一和步骤二预处理后的材料采用70%的酒精浸泡30s,无菌水清洗2次;
步骤四:采用5%次氯酸钠浸泡20min,无菌水清洗4次,完成消毒。
实施例2
将外植体材料切成小段或小块或片状或丝状,然后按以下步骤进行消毒:
步骤一:采用0.2%的洗洁精溶液浸泡材料15min,自来水冲洗40min;
步骤二:采用含有2%青霉素的自来水浸泡8min,自来水冲洗10min;
步骤三:对步骤一和步骤二预处理后的材料采用70%的酒精浸泡30s,无菌水清洗4次;
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