[发明专利]检测哮喘易感基因ADRB2突变位点的探针和方法有效
申请号: | 201410262409.0 | 申请日: | 2014-06-12 |
公开(公告)号: | CN104017878A | 公开(公告)日: | 2014-09-03 |
发明(设计)人: | 张昕;张丽;李凡 | 申请(专利权)人: | 山西大学 |
主分类号: | C12Q1/68 | 分类号: | C12Q1/68;C12N15/11 |
代理公司: | 山西五维专利事务所(有限公司) 14105 | 代理人: | 张福增 |
地址: | 030006 山*** | 国省代码: | 山西;14 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 检测 哮喘 基因 adrb2 突变 探针 方法 | ||
1.检测哮喘易感基因ADRB2突变位点的专用探针,特征在于,其是核苷酸序列如序列表中SEQ ID NO.4和SEQ ID NO.5所示DNA片段的混合物,或者是核苷酸序列如序列表中SEQ ID NO.4和SEQ ID NO.5所示序列的反向互补序列的DNA片段的混合物。
2.检测哮喘易感基因ADRB2突变位点的基因芯片,其特征在于,含有权利要求1所述的专用探针。
3.检测哮喘易感基因ADRB2突变位点的装置,其特征在于,包括如权利要求1所述的专用探针或者如权利要求2所述的DNA芯片。
4.如权利要求3所述的装置,其特征在于,所述的装置还包括引物对,所述的引物对中,一条引物的核苷酸序列如序列表中的SEQ ID NO.2,另一条引物的核苷酸序列如序列表中的SEQ ID NO.3。
5.如权利要求4所述的装置,其特征在于,所述的引物上含有荧光标记。
6.检测哮喘易感基因ADRB2突变位点的引物,其特征在于,其是核苷酸序列如序列表中SEQ ID NO.2或SEQ ID NO.3所示的DNA片段。
7.如权利要求6所述的引物,其特征在于,所述的引物上含有荧光标记。
8.一种检测哮喘易感基因ADRB2突变位点的方法,其特征在于,包括以下步骤:
(1)制备待测样本的总DNA,作为模板,用含检测标记的引物对进行PCR扩增,获得PCR产物,所述的引物对中,一条引物的核苷酸序列如序列表中的SEQ ID NO.2,另一条引物的核苷酸序列如序列表中的SEQ ID NO.3所示;
(2)将专用探针结合于基因芯片的片基上,洗去未结合的探针,获得检测哮喘易感基因ADRB2突变位点的基因芯片,所述的专用探针是核苷酸序列如序列表中SEQ ID NO.4和SEQ ID NO.5所示的DNA片段的混合物,或者是核苷酸序列如序列表中SEQ ID NO.4和SEQ ID NO.5所示序列的反向互补序列的DNA片段的混合物;
(3)在步骤(2)所得的检测哮喘易感基因ADRB2突变位点的基因芯片中加入步骤(1)所得的PCR产物,进行杂交,洗去未杂交的PCR产物;
(4)对步骤(3)所得的杂交后的基因芯片进行检测。
9.如权利要求8所述的方法,其特征在于,步骤(2)所述的基因芯片的片基是醛基片基,所述的探针是氨基化探针。
10.如权利要求8所述的方法,其特征在于,步骤(2)所述的基因芯片的另外的加样孔中加入β-action管家基因检测探针,所述的β-action管家基因检测探针的序列如序列表中SEQ ID NO.9所示序列的核苷酸片段。
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