[发明专利]绿原酸提取物的制备方法

说明书

技术领域

本发明涉及一种绿原酸提取物的制备方法，特别是由来源于各种方法得到的含绿原酸的产品制备其纯化提取物的方法。

背景技术

绿原酸是植物在有氧呼吸过程中经磷酸戊糖途径的中间产物所合成的一种苯丙素类物质，绿原酸主要存在于忍冬科忍冬属、菊科蒿属及杜仲科杜仲属植物中。葵花籽中绿原含量为1.5~3.3%，金银花中绿原含量为0.2~11.2%，杜仲叶绿原含量为1~5%。绿原酸具有利胆、抗菌、抗病毒、降压、升高白细胞及兴奋中枢神经系统等多种药理作用，绿原酸是透明质酸酶（HAase）和Gle-6-p位移酶的天然特异性抑制剂，也是选择性羟基自由基和过氧自由基的清除剂，可作为保健品、食品、药品、化妆品等工业的重要原料。分离纯化绿原酸的常见方法，有醇沉、无机盐沉淀、溶剂萃取、离子交换树脂分离、凝胶色谱分离、高效液相色谱分离以及大孔吸附树脂分离等方式。从产品的安全性、生产效率等方面来看，大孔吸附树脂分离纯化是工业化生产绿原酸的主要发展方向。如李进飞等报道了NKA-9型树脂对绿原酸吸附分离性能的研究（华西药学杂志，2004,19(1):1-4）、王芳等报道了大孔吸附树脂对绿原酸吸附性能的研究（海峡药学，2006,18(1):97-99），中国专利CN 102285885A等也公开了大孔吸附树脂分离纯化绿原酸的方法。目前文献报道的由大孔吸附树脂制备绿原酸的常规方法是：将含绿原酸的水溶液或水提取液，上大孔吸附树脂柱后，先用水洗涤除杂，再用乙醇洗脱（解析），收集乙醇洗脱液，除去溶剂，即得到绿原酸提取物，其中上柱液和洗涤用水的pH值为1~8，优选的pH值为1~4，洗脱用乙醇浓度为20~95%。申请人研究发现，目前报道的这类常规大孔树脂方法制备得到的绿原酸提取物的含量都较低。

发明内容

针对上述情况，本发明提供了一种绿原酸提取物的制备方法，特别是对由来源于各种方法得到的含绿原酸的产品制备其纯化提取物的方法。

本发明绿原酸提取物的制备方法，是使含有绿原酸的水溶液用第一大孔树脂吸附单元进行吸附分离，至流出水溶液中绿原酸的浓度≥上柱前水溶液中绿原酸的浓度后，用pH值2~8的水洗涤，收集、合并所述通过第一大孔树脂吸附单元后流出的含有绿原酸的水流出液和水洗液并调节pH值2~4后，用第二大孔树脂吸附单元进行吸附，然后用pH值2~4的水洗涤除杂后，再用乙醇体积含量为30~95%的乙醇-水溶液洗脱，收集洗脱液后除去溶剂，得到绿原酸提取物。

上述方法中作为制备原料的所述含有绿原酸的水溶液，可以来源于各种含绿原酸成分的原料，如，既可以包括含有绿原酸的药材或相应药材的加工品，如金银花、山银花、川银花、杜仲叶、忍冬藤、葵花籽粕；金银花、山银花、川银花的茎枝和/或叶，以及含有绿原酸的其它药用植物、药材和饮片等所得到的水提取液，也可以是由含有绿原酸的药材或相应药材加工品的提取物进一步制备的相应加工产品的水溶液。

深入的研究实验显示，大孔树脂对绿原酸及在其提取物中常见的如黄酮、皂苷等杂质性成分都具有吸附能力，但相比较，大孔树脂对绿原酸的吸附力（强度）较弱。因此，当大孔树脂吸附饱和后绿原酸最先流出，而黄酮、皂苷等其它成分则仍可被继续吸附，并且随着所述含有绿原酸的水溶液的继续进入，通过竞争性吸附作用，原已在树脂上被吸附的绿原酸还会被黄酮、皂苷等吸附力更强的成分置换（或替代）而脱离大孔树脂随水液流出。本发明正是利用这一特性，先用第一大孔树脂单元吸附饱和后使绿原酸流出，至水流出液中绿原酸的浓度≥上柱前水溶液中绿原酸的浓度后，再用水洗涤，即可基本洗尽大孔树脂上原已吸附的绿原酸成分，继续被吸附留存在大孔树脂上的则是与绿原酸相分离的大量黄酮、皂苷等欲除去的杂质性成分。将收集的通过第一大孔树脂吸附单元除杂后的含有绿原酸的水流出液和水洗液合并后，再按常规方法用第二大孔吸附树脂单元吸附，然后水洗涤进一步除杂后，再用醇解吸洗脱，洗脱液除去溶剂后，即得到高含量的绿原酸提取物。

本发明上述方法中所述的大孔树脂吸附单元，可采用最为常用装填有大孔吸附树脂的吸附柱等形式。所述的第一和第二大孔树脂吸附单元，根据实际情况，可以采用相互独立的两个大孔树脂吸附单元（可分别由单根和/或多根树脂吸附柱组成），也可以采用由同一大孔树脂吸附单元以交替方式轮换操作，分别作为第一和第二树脂吸附单元使用来实现。对于采用相互独立设置的第一和第二大孔吸附树脂单元而言，还可以采用将其适当并连和/或串连等组合方式操作，以满足特定的处理规模和实际生产的需要。