[发明专利]一种新麦草属植物细胞染色体中期分裂相标本制备方法

权利要求书

1.一种新麦草属植物细胞染色体中期分裂相标本制备方法，包括以下步骤：

⑴取材：在一天中任意时间取生长旺盛的盆栽新麦草的新生根1.5~2cm，并将其放入一个敞口的1.5mL或2.0mL的内壁附着水分的离心管中；

⑵在20~27℃条件下，将所述步骤⑴中装有根尖的离心管置于高压容器装置内，通入0.4~0.9MPa N₂O进行预处理，3.5~4.5h后即得预处理后的新根；

⑶将所述预处理后的新根用滤纸吸干水分，采用卡诺氏液固定20~24h，得到固定后的新根；

⑷将所述固定后的新根用蒸馏水漂洗3次，吸干水分后在体积浓度为45%的冰乙酸中解离3~8min，得到解离后的新根；

⑸将所述解离后的新根中的水分吸干后置于载玻片上，用干净的刀片去掉根尖的最前端的根冠区0.5~1.5mm，取分生区0.5~1.5mm的长度，加一滴体积浓度为45%的冰乙酸，盖上盖玻片，盖玻片的一侧垫一薄刀片，用镊子的基部轻轻敲击盖玻片，使组织成为一薄层，取走所述薄刀片，然后在酒精灯的火焰上烘烤至微热，在所述盖玻片上加一吸水纸，用拇指挤压所述盖玻片使细胞充分分散，得到压片；

⑹将所述压片置于光学显微镜下观察，选择染色体分散、清晰的细胞进行照相，以便进行荧光原位杂交，最后用玻璃刀做好盖玻片位置的标记，将做好的片子放入-80℃的冰箱保存即可。

2.如权利要求1所述的一种新麦草属植物细胞染色体中期分裂相标本制备方法，其特征在于：所述步骤⑵中预处理过程是指压强按恒定值的方式通入N₂O进行或压强按梯度递增的方式通入N₂O进行。

3.如权利要求1所述的一种新麦草属植物细胞染色体中期分裂相标本制备方法，其特征在于：所述步骤⑶中的卡诺氏液是由无水乙醇与冰醋酸按3mL：1 mL的比例混合而成。