[发明专利]海洋硫酸酯化糖胺聚糖SE-3及其制备方法

权利要求书

1.海洋硫酸酯化糖胺聚糖SE-3，其特征在于该海洋硫酸酯化糖胺聚糖SE-3单糖组分含有甘露糖：葡萄糖胺：葡萄糖醛酸：乙酰氨基半乳糖：半乳糖：岩藻糖的质量比例为1:1.5:0.92:3:1.8:2；该海洋硫酸酯化糖胺聚糖SE-3的分子量为10kDa至16kDa，硫酸基团的含量为10%至14%之间。

2.根据权利要求1所述的海洋硫酸酯化糖胺聚糖SE-3的制备方法，其特征在于包括以下步骤：

1）乌贼墨多糖的提取：取新鲜乌贼墨囊中乌贼墨浓缩后冻干后，采用酶解法处理后，沉淀烘干，再重新溶解后使用截留分子量为3500的透析袋对蒸馏水进行透析脱盐和除去小分子物质，得到乌贼墨多糖；

2）分离纯化：采用离子交换层析柱依次采用0.05mol/L、0.25mol/L、0.5mol/L的NaCl溶液三个梯度浓度的NaCl溶液进行梯度洗脱，收集0.01至0.1 mol/L、0.1至0.5 mol/L、0.2至1 mol/L的NaCl溶液洗脱，并收集所述的0.2至1 mol/L的NaCl溶液洗脱产物；所述的洗脱产物分子量为10kDa至16kDa。

3.根据权利要求1所述的海洋硫酸酯化糖胺聚糖SE-3的制备方法，其特征在于所述的梯度洗脱的截留相对分子质量为3500，流速为0.5至3 mL/min。

4.根据权利要求1所述的海洋硫酸酯化糖胺聚糖SE-3的制备方法，其特征在于所述的酶解法为两步酶解法，具体为按料液质量体积比1:10至1：30加入蒸馏水，40℃下磁力搅拌，使墨汁均匀分散后先采用木瓜蛋白酶提取1h～3h，加酶量1%～2%，提取温度55～65℃，pH 为6.5～7.5；接着采用胰蛋白酶水解1h～3h，提取温度55～65℃，pH8～10，加酶量0.1～0.5%；提取完后调pH至中性后加热灭酶；后调节pH至5～6.8，静置使黑色素沉淀后3000～10000 rpm 离心10～20min，取上清调节pH至中性后浓缩至原体积的1/10～1/20，使用终浓度为70～80%的乙醇进行沉淀。