[发明专利]一种用于结核分枝杆菌感染检测、临床治疗疗效跟踪和抗结核疫苗开发的试剂及其应用

说明书

技术领域

本发明属于生物医学检验领域，具体涉及一种用于结核分枝杆菌感染检测、临床治疗疗效跟踪和抗结核疫苗开发的试剂及其应用。

背景技术

结核病是我国，同时也是全球三大传染性疾病之一，2013年，世界卫生组织(WHO)估测中国结核病总病例约140万人，占全球总病例中的12％，仅次于印度位居全球第二，结核病严重阻碍我国经济和社会发展。

现阶段，结核病的诊断、预后和抗结核疫苗开发仍然面临巨大挑战。传统的结核菌素皮试试验(TST)、结核菌痰涂片或结核菌痰培养等诊断方法的特异性或敏感性较低，有待改进。免疫学检测方法是现阶段诊断结核分枝杆菌感染的重要辅助手段之一，其中以抗原特异性γ-干扰素的释放实验(IGRA)为主。现有的商用试剂盒有T-SPOT.TB和QuantiFERON-TB Gold In-Tube(QFT-IT)。其中，T-SPOT.TB使用的抗原是ESAT-6和CFP-10，而QFT-IT使用的抗原是ESAT-6、CFP-10和TB7.7。这些抗原都由结核分枝杆菌特异性的RD区(Region of Difference)基因编码，能较好地避免接种卡介苗(BCG)的干扰。

但是，现有研究表明ESAT-6，CFP-10和TB7.7主要表达于结核分枝杆菌的早期感染阶段，而且其他非结核分枝杆菌类的M.marinum，M.kansasii，M.szulgai或M.gordonae等也表达ESAT-6，CFP-10或TB7.7，所以当患者感染此类细菌时会出现假阳性结果。而且，研究表明我国人群存在较严重的非结核分枝杆菌感染情况，所以T-SPOT.TB和QFT-IT的结核病诊断价值在我国不理想，表现为其诊断的敏感性和特异性均介于80％－90％之间。同时，特异性免疫学检测在结核病的临床治疗疗效跟踪中的尚未得到广泛应用。

研究表明，筛选新的T细胞反应性抗原在结核病的诊断、预后和疫苗开发中具有重要意义。人体感染结核分枝菌后，体内会生成结核分枝杆菌特异性和记忆性T细胞。抗原特异性T细胞不仅在结核病的诊断中具有重要意义，在临床抗结核治疗病程中，随着患者体内结核分枝杆菌荷载量的下降或消失，体内的抗原特异性T细胞大量凋亡而进入收缩期，只保留少数抗原特异性的记忆性T细胞，因而，体外用相同抗原刺激不同治疗阶段的患者T细胞时，分泌细胞因子的细胞数量以及细胞因子的分泌量与治疗前相比都会下降，并与疾病进程相一致，因而具有较好的临床预后价值。同时，与结核分枝杆菌毒性株中特有的RD区抗原相比，BCG表达的抗原安全性更高。因而具有更好的亚单位疫苗或重组疫苗的开发价值。

发明内容

本发明要解决的技术问题之一是提供一种新的用于结核分枝杆菌感染检测、临床治疗疗效跟踪和抗结核疫苗开发的试剂。

本发明要解决的技术问题之二是提供上述试剂的用途。

本发明的内容之一是提供一种用于结核分枝杆菌感染检测、临床治疗疗效跟踪和抗结核疫苗开发的试剂，包括Rv3006抗原或多肽或其类似物；所述Rv3006抗原的氨基酸序列从N端到C端如下：

MWTTRLVRSGLAALCAAVLVSSGCARFNDAQSQPFTTEPELRPQPSSTPPPPPPLPPVPFPKECPAPGVMQGCLESTSGLIMGIDSKTALVAERITGAVEEISISAEPKVKTVIPVDPAGDGGLMDIVLSPTYSQDRLMYAYISTPTDNRVVRVADGDIPKDILTGIPKGAAGNTGALIFTSPTTLVVMTGDAGDPALAADPQSLAGKVLRIEQPTTIGQTPPTTALSGIGSGGGLCIDPVDGSLYVADRTPTADRLQRITKNSEVSTVWTWPDKPGVAGCAAMDGTVLVNLINTKLTVAVRLAPSTGAVTGEPDVVRKDTHAHAWALRMSPDGNVWGATVNKTAGDAEKLDDVVFPLFPQGGGFPRNNDDKT，如SEQ ID NO:1所示；

所述多肽为一种氨基酸聚合物，其长度包含但不限于20个氨基酸残基；所述其类似物为与其同源性在75％以上的多肽及经过天然或人工修饰后的氨基酸聚合物。

所述多肽为编号LPPZ0-LPPZ35的氨基酸聚合物，其氨基酸顺序从N端到C端列于下：

LPPZ0：MWTTRLVRSG LAALCAAVLV，如SEQ ID NO:2所示；

LPPZ1：LAALCAAVLV SSGCARFNDA，如SEQ ID NO:3所示；