[发明专利]一种利用柳枝稷幼穗进行无性繁殖的方法

权利要求书

1.一种利用柳枝稷幼穗进行无性繁殖的方法，其特征在于，包括以下操作：

1)待柳枝稷生长发育至第4个节完全露出、幼穗已形成时，从靠近地面处将柳枝稷分蘖剪下，从下向上剥去柳枝稷分蘖上的叶片至节间长度小于1cm时停止，距该节间上端茎节上下各1.2～1.5cm切下，获得包含幼穗的外植体；所述的外植体中包含有2cm长度的幼穗，具有正常花原基组织；

2)将外植体消毒并用无菌水漂洗；

3)无菌环境下，将外植体两端各切去0.2～0.5cm，将外植体纵向切为两半，切口向下接种到诱导培养基上；接种后置于恒温光照培养箱中，培养30～40天至穗芽形成；

所述的诱导培养基是以MS为基础培养基，并添加6-BA、琼脂粉和蔗糖；所述的诱导培养基的成分为：MS基础培养基4.43g/L，3mmol/L的6-BA、7.5g/L的琼脂粉和30g/L的蔗糖；

4)将形成的穗芽沿基部2～3mm处切除，并再次接种到诱导培养基上，待新生芽生长至1.2～1.5cm，重复继代培养3～4次，获得扩繁后的穗芽；

5)在不损害生长点的情况下，将穗芽从基部自芽块上拆分下来，将穗芽单独直接扦插到培养基质中，培养7天后，待单独的穗芽生根并发育成独立的幼苗，将幼苗连同培养基质栽植于温室或大田。

2.如权利要求1所述的利用柳枝稷幼穗进行无性繁殖的方法，其特征在于，所述的外植体的消毒处理为：先用体积分数为70％的酒精消毒1～2min，然后用体积分数5～8％的次氯酸钠溶液消毒2～3min；

消毒完成后并用灭菌水漂洗3次。

3.如权利要求1所述的利用柳枝稷幼穗进行无性繁殖的方法，其特征在于，所述在恒温光照培养箱进行培养时，其培养温度为20～25℃、每天光照20h、黑夜4h。

4.如权利要求1所述的利用柳枝稷幼穗进行无性繁殖的方法，其特征在于，在进行继代培养时，采用上次培养的新生芽进行接种，接种时新生芽的长度为1.0cm。

5.如权利要求1所述的利用柳枝稷幼穗进行无性繁殖的方法，其特征在于，以体积比计，所述的培养基质的组份为栽培土：腐叶土：河沙＝1：3：1，栽植前一天在基质中加水，直到吸水饱和。

6.如权利要求1所述的利用柳枝稷幼穗进行无性繁殖的方法，其特征在于，所述的幼苗为相同基因型的幼苗。