[发明专利]一种利用大孔树脂分离纯化红花檵木中总多酚的方法

说明书

技术领域

本发明涉及分离纯化技术领域，尤其涉及一种利用大孔树脂分离纯化红花檵木中总多酚的方法。

背景技术

红花檵木(Loropetalum chinense Olive var.rubrum Yieh)系金缕梅科(Hamamelidaceae)檵木属檵木(L.chinense Olive)的变种,为常绿灌木或小乔木，是湖南本土野生资源，零星分布于湖南浏阳、平江、醴陵和江西萍乡上栗区湘赣。《本草纲目》、《植物名实图考》、《福建民间草药》、《湖南药物志》中都有记载檵木的根、叶、花、果均可入药，具有清热解毒、通经活络、止咳、消炎、镇痛、止血、兴奋子宫、扩张血管等功效，有研究证实其多种色素具抗氧化，抗菌活性。

多酚广泛存在于水果、蔬菜、牧草和药用植物中，是植物在长期自然选择的过程中产生的一些次级代谢产物。由于多酚是一种重要的生理活性物质，有着很强的生物活性和药理活性，到目前为止，在植物中已经发现近一万种结构独特的多酚。近年来，国内外学者对类多酚的研究更加深入，相对集中在分离纯化、结构鉴定、清除自由基、药理作用、抗辐射作用、抗癌和抗肿瘤等方面。与此同时，多酚对微生物的抑制和杀灭作用，也逐渐引起了人们的广泛关注。研究资料显示，植物多酚具有较强的抑菌作用，及明显的抗氧化、抗老化、抑制胆固醇上升和抗癌等功效，摄取植物多酚对预防和控制疾病的发生具有明显效果。感冒、口腔炎、胃肠炎以及皮肤疮疡等疾病多与病毒和细菌等微生物感染有密切关系。很多食品有杀灭和抑制微生物导致疾病的功效，能够发挥抗病毒、消炎杀菌及驱虫作用。

王金梅等采用顶空固相微萃取和气质联用技术从花和叶中分别鉴定出26和29个化合物，测定其花的挥发性成分相对含量明显比叶高。唐华等分析比较了檵木和红花檵木叶片挥发油的成分，在3种叶片中分别鉴定出25、21、23种成分,含量较多的组分有:顺-3-己烯-1-醇、棕榈酸、硬脂酸、油酸。戴菁等采用不同溶剂提取红花檵木植株3种不同颜色叶片中的色素，分析花色素的含量结果表明：红花檵木红色叶片中总花青素和多酚含量都相对较高，绿色叶片中含叶绿素和类胡萝卜素多。唐华等研究结果表明檵木和红花檵木叶中含有大量不饱和脂肪酸，可作为中药材原料。卢成英,唐克华等用20％乙醇加微波处理提取的红檵木花红色素具有较强的抗菌活性。刘如龙,付鸣佳提取的红花檵木花朵中的多酚类物质，对细菌和真菌有较好的抑制细菌作用。

但是，目前从红花檵木叶中提取红花檵木多酚的方法大都存在着方法复杂，并且提取的产率和纯度不高，并且得到的产物抑菌活性差等缺点。

发明内容

本发明目的在于提供一种利用大孔树脂分离纯化红花檵木中总多酚的方法。

本发明采取的技术方案是：

本发明的利用大孔树脂分离纯化红花檵木中总多酚的方法的具体步骤如下：

(1)将红花檵木叶进行粉碎，然后过18目筛，然后往红花檵木粉末中加入5-15倍量的60％乙醇，然后回流提取3次，每次1-3h，合并提取液，进行减压浓缩，浓缩至每毫升提取液含生药量0.2-0.8g；

(2)将步骤(1)制备的提取液以1-5ml·min^-1的流速经大孔树脂柱吸附，收集过柱残液，然后用蒸馏水进行洗脱，蒸馏水用量为2-6BV，再用30％乙醇进行洗脱，30％乙醇用量为2-6BV，最后用70％乙醇进行洗脱，70％乙醇用量为1-5BV，收集70％乙醇洗脱液，进行浓缩干燥，即得红花檵木总多酚提取物。

步骤(1)中，优选往红花檵木粉末中加入10倍量的60％乙醇，然后回流提取3次，每次2h。

步骤(1)中，优选浓缩至每毫升提取液含生药量0.4g。

步骤(2)中，大孔树脂为HPD-300、HPD-450、DM-130、AB-8、ADS-17、D101、HPD-826、HPD-600、HPD-400中的一种，优选大孔树脂为HPD-600。

步骤(2)中，优选将步骤(1)制备的提取液以2ml·min^-1的流速经大孔树脂柱吸附。

步骤(2)中，优选用蒸馏水进行洗脱，蒸馏水用量为4BV，再用30％乙醇进行洗脱，30％乙醇用量为4BV，最后用70％乙醇进行洗脱，70％乙醇用量为3BV。

步骤(2)中，流经大孔树脂的提取液中的生药量和大孔树脂的重量比为1-2：1，优选为1.4：1。

本发明的积极效果如下：