[发明专利]海洋来源寡聚古罗糖醛酸的应用

说明书

技术领域

本发明涉及生物医药领域，尤其涉及海洋来源寡聚古罗糖醛酸应用于制备抗炎药物的应用。

背景技术

炎症是一种极为常见且很重要的病理过程，已被证明与多种急性疾病和慢性疾病具有密切的联系，如肥胖症、糖尿病、动脉粥样硬化、高血压、中风、肿瘤、多囊卵巢综合症、老年痴呆症等。抗炎疗法是免疫疗法中备受关注的研究热点之一，寡糖已被证明具有抗肿瘤、抗炎、增强免疫作用等多种重要的生物学活性。近年来，随着寡糖结构测定和生物活性研究取得明显的进展，寡糖及糖复合物的研究在国际上引起了日益广泛的重视。

褐藻酸钠经过稀盐酸、褐藻胶裂解酶、双氧水降解分别得到酸解、酶解、氧化降解的寡聚物。酶解寡糖具有抗肿瘤、抗炎、增强免疫作用等多种重要的生物学活性，但是关于氧化降解的寡聚物的活性报道较少，目前尚没有关于海洋来源寡聚古罗糖醛酸抗炎作用方面的报道。

发明内容

本发明旨在提供一种海洋来源的寡聚古罗糖醛酸的应用，将所述海洋来源寡聚古罗糖醛酸应用于制备抗炎药物；所述海洋来源寡聚古罗糖醛酸的结构式为：其中，n为1、2、3、4、5或6。

本发明发现褐藻酸钠氧化降解产物MdOA可以有效抑制LPS诱导的炎症细胞模型生成过量NO及iNOS、COX-2的过量表达，还能抑制相关炎症细胞因子TNF-α、IL-6、IL-1β的过量生成，说明了MdOA具有良好的抗炎活性，可应用于制备抗炎药物或者保健食品。

附图说明

图1A是本发明实施例1中MdOA的细胞活力实验检测结果图；

图1B是本发明实施例1中MdOA抑制LPS诱导的RAW264.7细胞生成NO的浓度梯度实验检测结果图；

图2A是本发明实施例2中MdOA抑制LPS诱导的RAW264.7细胞表达iNOS mRNA的浓度梯度实验检测结果图；

图2B是本发明实施例2中MdOA抑制LPS诱导的RAW264.7细胞表达iNOS蛋白的浓度梯度实验检测结果图；

图3A是本发明实施例3中MdOA抑制LPS诱导的RAW264.7细胞表达COX-2mRNA的浓度梯度实验检测结果图；

图3B是本发明实施例3中MdOA抑制LPS诱导的RAW264.7细胞表达COX-2蛋白的浓度梯度实验检测结果图。

图4A是本发明实施例4中MdOA抑制LPS诱导的RAW264.7细胞表达炎症细胞因子TNF-α的浓度梯度实验检测结果图；

图4B是本发明实施例4MdOA抑制LPS诱导的RAW264.7细胞表达炎症细胞因子IL-1β的浓度梯度实验检测结果图；

图4C是本发明实施例4MdOA抑制LPS诱导的RAW264.7细胞表达炎症细胞因子IL-6的浓度梯度实验检测结果图。

具体实施方式

为了使本发明所要解决的技术问题、技术方案及有益效果更加清楚明白，以下结合附图及实施例，对本发明进行进一步详细说明。应当理解，此处所描述的具体实施例仅仅用以解释本发明，并不用于限定本发明。

NO是体内重要的生理递质、细胞内外信息传递的化学信使，它参与机体生理过程的调节和宿主防御及免疫反应。很多疾病发生时，NO的含量是增加的，并通过增加局部血流促进血浆的渗出及水肿的形成，NO在炎症反应中发挥了复杂作用。通过对药物抑制LPS诱导的炎症细胞模型产生的过量NO及过量表达的iNOS、COX-2的mRNA和蛋白的研究，可揭示药物的抗炎活性。炎症的发生都伴随着炎症因子的大量释放，故而细胞内炎症因子的含量可直接反应细胞炎症的水平，本发明通过检测肿瘤坏死因子(TNF-α)、白介素-6(IL-6)、白介素-1β(IL-1β)三种与炎症的发生发展息息相关的重要炎症因子，反应细胞内的炎症水平，从而反应药物的抗炎活性。

以下结合具体实施例对本发明作进一步说明。

实验原料以及相关试剂

褐藻酸钠购于上海诺泰化工有限公司；双氧水购于西陇化工股份有限公司；RPMI1640培养基、胎牛血清购于美国Hyclone公司；细胞裂解液(RIPA)购于上海博彩生物科技公司；iNOS单克隆抗体、COX-2单克隆抗体购于德国CST公司；反转录试剂盒购于日本Takara公司；总RNA提取试剂盒购于上海飞捷生物技术有限公司；TNF-α、IL-6、IL-1β的ELISA试剂盒购于欣博盛生物公司；显影液、定影液购于日本富士公司；青霉素、链霉素、LPS购于美国Sigma公司；所使用试剂及设备如无特别说明均可以从商业途径获得。

海洋来源寡聚古罗糖醛酸的制备