[发明专利]一种三疣梭子蟹苗种质量检测技术

说明书

技术领域：

本发明涉及到一种三疣梭子蟹苗种质量的检测方法，是一种利用三疣梭子蟹苗种对于逆境环境的忍耐力不同而开发出的海洋水产养殖苗种质量检测技术，属于水产养殖学领域。

背景技术：

随着近海渔业资源的日益减少，三疣梭子蟹(Portunus trituberculatus)海水养殖业已在全国沿海地区迅速发展，养殖面积不断扩大，蟹苗生产已成为各育苗厂家的主体产业之一，苗种质量好坏，直接关系到各育苗厂家的经济命运，也是成为关系到养殖户能否养殖成功的关键因素之一。但是在水产养殖业中，至今还没有行之有效的较为精确评定水产养殖苗种质量好坏的方法。

对于蟹类苗种如何选择，当前主要集中在中华绒螯蟹的研究上。何文平和杨丽霞(2005)认为，中华绒螯蟹蟹苗质量的鉴别，可以从以下几个方面进行：1、了解蟹苗生产的过程：购买蟹苗时，如果是人工繁殖的蟹苗，就要了解蟹苗的日龄、饵料投喂情况，淡化处理过程等情况。一般饲养管理好，蟹苗日龄达5天以上，经过多次淡化处理，池内苗种密度较大，并且比较活跃，同一批蟹苗大小规格一致，一般要求80％-90％规格相同，说明蟹苗质量较好，反之则较差；2、观察外表：优质蟹苗体色淡黄，稍带光泽，蟹池不含死苗杂物，蟹苗活动能力强，反应灵活，将蟹苗沥干水后，用手抓一把轻轻一握，松开手放到蟹苗箱内，如果蟹苗能立即散开，爬行迅速，则质量较好；3、抽样检查：将蟹苗捞起一部分，沥去水分，称1-2克蟹苗记数，规格达到14-16万只/千克的，说明蟹苗质量较好，可以购买；4、模拟试验：将要出池的蟹苗称取1-2克，用湿纱布包起来，放在阴凉处，经8-10个小时存放后检查，若80％以上的蟹苗都是活的，说明质量较好。

从以上可以看出，对于苗种质量的检测主要依靠的是传统经验，这些经验能够快速地对苗种质量进行初步的估计，但是不能做到精细分析。事实上，我们常说的优良苗种主要体现在两个方面，一是养殖过程中死亡率低，二是生长速度较快。苗种质量的好坏除了品种差异外，主要取决于培育过程中各种环境因素的影响。不同的环境因子对于虾蟹类苗种培育的影响是不一样的。徐建荣等(2006)的研究表明，盐度、饵料、光照等对中华绒螯蟹大眼幼体蜕壳生长具有显著影响。因此，这给我们提供了检测苗种质量的思路，即可以通过检测不同苗种对于不利环境因子的抵抗程度来确定苗种的好坏，而目前这方面的研究技术在国内外还处于空白状态。

发明内容：

本发明是描述利用三疣梭子蟹苗种在逆性环境下存活时间长短的差异而建立起来的一种苗种质量检查技术，解决了养殖户在三疣梭子蟹养殖放苗时对苗种质量进行评估的这一问题，主要内容为：

一、重金属离子的选择和浓度设定

利用重金属离子的毒性提供逆性环境，具体选择如下化学试剂作为重金属离子的来源：硫酸铜(CuSO₄·5H₂O)(国药集团化学试剂有限公司)、硫酸亚铁(FeSO₄)(国药集团化学试剂有限公司)、四水合氯化锰(Mncl₂.4H₂O)(国药集团化学试剂有限公司)、七水合硫酸锌(ZnSO₄.7H₂O)(国药集团化学试剂有限公司)、氯化高汞(Hgcl₂)(国药集团化学试剂有限公司)、硫酸锌(ZnSO₄.7H₂O)(国药集团化学试剂有限公司)。

各离子分别设置5个梯度浓度，即5个水平，具体见表1。

表1各重金属离子浓度梯度

二、正交试验设计方案

采用6因素5因子正交表设计以上这些重金属离子对于三疣梭子蟹二期幼蟹的单独或联合毒性，共设置3个重复和3个对照。

正交试验表设置如下(见表2)：

表2正交试验设计表

共设置3个重复和3个对照。

三、重金属对三疣梭子蟹二期幼蟹的急性毒性实验

三疣梭子蟹苗种生长达到二期幼蟹时才会出售给养殖户养殖，因此本实验中选择二期幼蟹作为受测对象。取25个烧杯，放在泡沫箱中，并保持温度25℃，依次按上述表2中的每一行加入各种重金属试剂并使相应的金属离子达到相应的浓度，每个烧杯放5只幼蟹，每隔2小时记录一次死亡个体情况。

以平均死亡时间作为衡量致死效应的依据，平均死亡时间(Dt)的计算公式：