[发明专利]索拉菲尼个性化治疗肝癌的分型诊断试剂盒

说明书

技术领域

本发明涉及生物医药领域；更具体地，本发明涉及索拉菲尼个性化治疗肝癌的分型诊断试剂盒。

背景技术

原发性肝癌(简称肝癌)是世界范围内第六位的最常见恶性肿瘤，每年新增病例约70余万，其中肝细胞癌约占80％。肝癌是中国最常见的恶性肿瘤，我国每年新发肝癌病例约占全球发病总数的55％，肝癌亦是我国第二大肿瘤致死原因。至今，手术切除仍是治疗肝癌的最佳治疗方法，也是早期肝癌的首选治疗措施。但由于原发性肝癌发病隐匿，发展快速，确诊时能手术切除者仅为10％左右，即使施行手术，仍有许多病例无法完全切除或肿瘤难以避免术后复发。此外，由于手术对人体的创伤较大，会使患者的免疫力降低，并且导致一系列并发症。对于晚期肝癌，多因肝功能不全而无法手术。这一部分病人，需通过各种非手术切除的方法进行治疗，或者先行非手术治疗，让肿块缩小局限，再行手术切除治疗，即二期切除，可使病人获得较好的益处。因此，寻找有效的肝癌非手术治疗方式对于提高肝癌患者，尤其是中晚期肝癌患者的生存率是至关重要的。

索拉菲尼作为一种新型的肿瘤药物越来越受到人们的重视。但是其依然存在并不是所用肝癌患者都有效的问题(Shen YC et al，Liver Cancer.20132(3-4)：345-364.)。因而，索拉菲尼联合用药也得到关注。近年来，自噬在肿瘤中的作用及功能成为了热点问题(Choi，A.M.et al，N Engl J Med.368(19)1845-6)。特别是自噬抑制剂作为治疗肿瘤的辅助用药，可以达到同等条件下低副作用的效果。自噬抑制剂羟氯喹联用索拉菲尼可以更有效的治疗肝癌(Shi YH et al，Autophagy.2011Oct；7(10)：1159-72)。虽然这种治疗方案可以有效提高索拉菲尼对肝癌的治疗效果，但是，这种联合用药疗法的特异性问题亟待解决。

Gankyrin是人26S蛋白酶体的一个非ATP酶调节亚基，包含七个ankyrin序列。2000年发现其在人肝癌组织中的高表达。Gankyrin可以通过影响MDM2/P53，CDK4/Rb，NF-kb/RelA，RhoA/ROCK/Ras，PI3K/AKT/HIF-1alpha，Wwp2/Oct4信号通络影响肝癌的发生发展。Gankyrin已经证实可以作为肝癌治疗的重要靶点(Li H et al，Gastroenterology.2005，128(7)：2029-41)。在临床应用这些研究结果都提示我们Gankyrin在肿瘤的发生发展过程中起着无可替代的重要作用。并且有验证证实Gankyrin对p53以及Oct4的调控有助于肝癌细胞抵御化疗药物引起的肿瘤细胞的死亡。

目前，有关Gankyrin在肝癌的发展发生中的报道很多，但至今未见Gankyrin作为索拉菲尼联用羟氯喹分子诊断试剂盒的报道。

发明内容

本发明的目的在于提供索拉菲尼个性化治疗肝癌的分型诊断试剂盒。

在本发明的第一方面，提供Gankyrin蛋白的用途，用于制备进行肝癌的索拉菲尼治疗的预后评估的诊断试剂。

在一个优选例中，所述的预后包括：肝癌切除术后的预后。

在另一优选例中，所述的索拉菲尼治疗还包括：索拉菲尼联合氯喹或3-甲基腺嘌呤治疗。

在本发明的另一方面，提供特异性检测Gankyrin蛋白表达水平的试剂的用途，用于制备进行肝癌的索拉菲尼治疗的预后评估的诊断试剂盒。

在一个优选例中，所述的特异性检测Gankyrin蛋白表达水平的试剂是抗人Gankyrin的抗体。

在本发明的另一方面，提供一种用于肝癌的索拉菲尼治疗的预后评估的试剂盒，所述试剂盒中包括：特异性检测Gankyrin蛋白表达水平的试剂。

在一个优选例中，所述的试剂盒中还包括：携带有可检测信号分子的检测抗体。

在另一优选例中，所述的可检测信号分子选自：辣根过氧化物酶、碱性磷酸酯酶、葡萄糖氧化酶、β-D-半乳糖苷酶、脲酶、过氧化氢酶、或葡萄糖淀粉酶。

在另一优选例中，所述的试剂盒中还包括：免疫组化试剂；较佳地，所述的免疫组化试剂包括：显色试剂，二甲苯，乙醇，H₂O₂甲醇液，抗原修复液，封闭液，PBS，中性树脂。

在另一优选例中，所述的可检测信号分子是辣根过氧化物酶，还包括免疫组化试剂：

内源性过氧化物酶阻断剂；

DAB缓冲液；

DAB底物；

苏木素体细胞染色液；

空白对照试剂；

柠檬酸组织抗原修复液；