[发明专利]一种Rho激酶抑制剂Y27632化合物的制备方法

说明书

技术领域

本发明涉及一种化合物的制备方法，特别是一种Rho激酶抑制剂Y27632化合物的制备方法。 

背景技术

化合物Y27632是一种活性高、选择性好的Rho激酶抑制剂，它在深入理解Rho激酶的生理作用上具有重要的作用。作为重要的生化试剂，Y27632广泛应用于Rho-关联蛋白激酶信号通道的研究中。Y27632也被广泛应用于多种疾病(例如心血管疾病、癌症、艾滋海默症)的治疗和诊断的研究中。所以高效实用地合成制备Y27632具有重要的意义。 

Y27632的化学结构式如下： 

现有技术中，Y27632的合成，文献报道了两种合成方法。一种方法为WO2004/022541报道，该方法以1,4-二羟甲基环己烷为起始原料，经过10步反应后以10％的总收率合成了化合物Y27632。在这一方法中，其手性胺的构建是通过手性苯乙胺的诱导加成来实现的，其ee值相对较低。文献报道的分析数据语焉不详，难以确定其光学活性。第一种方法的合成步骤如下： 

另一种方法中，为了提高光学活性，Gerald Dragger报道了使用手性胺为原料，用铑碳加氢来构建反式的环己烷。虽然此方法可以很好的保证胺的光学活性，但是需要在高温高压条件下加氢，而且铑催化剂价格昂贵，导致该方法并不具有太大的实用性。第二种方法的合成步骤如下： 

发明内容

针对上述技术问题，本发明公开一种Rho激酶抑制剂Y27632化合物的制备方法，包括以下步骤： 

a、将原料化合物1即(反式)-1,4-环己二甲酸单酯和二甲基羟胺加入至N₂保护的三口烧瓶中，随后加入二氯甲烷和EDCI。0℃条件下加入N,N'-二甲基氨基吡啶，室温下搅拌过夜。反应液水洗后用二氯甲烷萃取，合并有机相，再分别依次用盐酸、饱和NaHCO₃、水以及饱和NaCl溶液洗涤。有机相干燥，过滤浓缩，得到化合物2即(反式)-4-(N-甲氧基-N-甲基甲酰胺)环己基甲酸酯。 

b、将所述化合物2加入至三口烧瓶中，再加入THF。在N₂保护下，降温至-20℃，保持10min，缓慢加入甲基锂乙醚溶液。滴加完毕后，0℃继续搅拌30min。反应完成后，向反应瓶中滴加盐酸以及H₂O。将有机相分离浓缩，再溶于乙酸乙酯中。用H₂O稀释水相中的固体，然后分别依次用乙酸乙酯进行萃取。合并所有有机相，干燥过滤浓缩，过柱纯化，得到化合物3即(反式)-4-乙酰基环己基甲酸酯。 

c、将所述化合物3和THF加入至三口烧瓶中，在N₂保护下，降温至-78℃。向反应瓶中加入R-CBS并保持在-78℃，继续搅拌5min。然后，向反应液中滴加含反式-4-乙酰基环己甲酸甲酯的THF溶液，滴加完毕后，继续搅拌10min，然后缓慢升温至0℃，保持0℃的温度继续搅拌90min。反应完成后，降温至-70℃～-80℃，缓慢加入MeOH进行淬灭反应。浓缩反应液，得到含有白色固体的粘稠液体。将所述粘稠液体溶解于乙酸乙酯中，依次分别用1N的盐酸、饱和NaCl以及H₂O洗涤，干燥浓缩，得到化合物4即(反式)-4-(1S-乙醇)环己基甲酸酯。 

d、将所述化合物4、邻苯二甲酰亚胺、三苯基磷加入至三口烧瓶中，在N₂保护下，加入THF。降温至0～5℃，向反应液中缓慢滴加偶氮二甲酸二异丙酯，滴加时温度保持在5℃以下。搅拌过夜。反应完成后，浓缩去除THF，再加入石油醚和乙酸乙酯的混合液剧烈搅拌，析出大量的黄色固体。过滤，用石油醚和乙酸乙酯的混合液淋洗滤饼。浓缩过柱，得到化合物5即(反式)-4-[乙基-1R-(邻苯二甲酰亚胺)]环己基甲酸酯。 

e、将所述化合物5、水合肼以及无水乙醇加入至单口瓶中，加热回流1～2h。待反应完成后，冷却过滤，滤液浓缩至无固体析出，得到化合物6即(反式)-4-(乙基-1R-胺基)环己基甲酸酯。 

f、将所述化合物6、Boc酸酐、Et3N以及THF加入至单口瓶中。在N₂保护下，搅拌3h。浓缩除去THF，再加入乙酸乙酯，混匀后再依次分别用盐酸、饱和饱和NaHCO₃以及水洗涤。有机相干燥，过滤浓缩后，过柱分离，得到化合物7即(反式)-4-[乙基-1R-胺基(N-叔丁氧羰基)]环己基甲酸酯。