[发明专利]使用信号探针的方法和材料

权利要求书

1.含有第一核酸链和第二核酸链的信号探针，所述第一和第二链各包含能够杂交的相互互补区域，其中所述第一链在一末端具有淬灭剂部分和所述第二链在所述链杂交时与淬灭剂部分相邻的末端具有荧光团，其中一条链与目的RNA中的靶序列或与目的RNA相关的靶序列杂交，其中所述靶序列与所述链的结合产生可检测荧光信号。

2.权利要求1的探针，其中所述淬灭剂部分是铊或金纳米颗粒。

3.权利要求2的探针，其中所述淬灭剂部分是金纳米颗粒。

4.权利要求1－3中任一项的探针，其中所述探针含有超过一个的淬灭剂部分和荧光团对。

5.权利要求1－3中任一项的探针，其中所述探针包含多个荧光团。

6.检测细胞中目的RNA表达的方法，包括如下步骤：

a)提供潜在表达目的RNA的细胞；

b)将所述细胞暴露于权利要求1－5中任一项的探针；和

c)检测在所述探针与目的RNA中的靶序列或与目的RNA相关的靶序列结合时所产生的荧光信号。

7.权利要求6的方法，其中所述检测采用荧光激活细胞分选仪技术、荧光显微镜或荧光计技术实施。

8.权利要求6或7的方法，其进一步包括分离展示所述可检测信号的细胞的步骤。

9.权利要求8的方法，其中所述分离步骤采用荧光激活细胞分选仪技术实施。

10.产生细胞系的方法，其包括培养在权利要求8的方法中分离的细胞的步骤。

11.权利要求6－10中任一项的方法，其中所述目的RNA包含如下中的一个或多个：信使RNA、反义RNA、siRNA、tRNA、结构RNA、核糖体RNA、hnRNA和snRNA。

12.权利要求6－9和11中的任一项的方法，其中所述细胞是活细胞。

13.定量细胞中目的RNA的表达水平的方法，其包括：

a)将所述细胞暴露于权利要求1－5中任一项的信号探针中；

b)定量在所述探针与细胞中目的RNA中的靶序列或与细胞中目的RNA相关的靶序列结合时所产生的信号水平；和

c)将所述信号的水平与目的RNA的表达水平相关联。

14.权利要求13的方法，其中所述定量采用荧光激活细胞分选仪技术或荧光显微镜实施。

15.权利要求13或14的方法，其进一步包括分离展示所述可检测信号的细胞的步骤。

16.权利要求15的方法，其中所述分离步骤采用荧光激活细胞分选仪技术实施。

17.产生细胞系的方法，其包括培养权利要求15的方法中分离的细胞的步骤。

18.权利要求13－17中任一项的方法，其中所述目的RNA包含如下中的一个或多个：信使RNA、反义RNA、siRNA、tRNA、结构RNA、核糖体RNA、hnRNA和snRNA。

19.权利要求13－16和181中的任一项的方法，其中所述细胞是活细胞。