[发明专利]一种以冷冻法去除鹅、鸭卵黄中的脂蛋白及脂质的方法在审
申请号: | 201410223049.3 | 申请日: | 2014-05-23 |
公开(公告)号: | CN103992403A | 公开(公告)日: | 2014-08-20 |
发明(设计)人: | 宁康健;吕锦芳 | 申请(专利权)人: | 安徽科技学院 |
主分类号: | C07K16/02 | 分类号: | C07K16/02 |
代理公司: | 北京轻创知识产权代理有限公司 11212 | 代理人: | 沈尚林 |
地址: | 233100 *** | 国省代码: | 安徽;34 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 冷冻 去除 卵黄 中的 脂蛋白 方法 | ||
技术领域
本发明涉及一种以冷冻法去除鹅、鸭卵黄中的脂蛋白及脂质的方法。
背景技术
抗体(免疫球蛋白,Ig)是指机体受到外来抗原物质刺激后,B细胞识别抗原后活化、增殖分化为浆细胞,由浆细胞合成和分泌的能与相应抗原特异性识别和结合的一类球蛋白。经特定抗原免疫后的鹅、鸭可产生相应的特异性抗体,有研究证实,家禽的卵黄对抗体有浓集作用,使其不断储存于卵黄中,这种抗体称为卵黄抗体(Immunoglobulin of yolk,IgY),卵黄抗体是当今生物科学研究领域的一项重大发现。
IgY的分离、提取与纯化:分离主要是除去卵黄中高含量的脂肪及脂蛋白,以获得水溶性组分(Water Soluble Fraction,WSF)。卵黄中的主要成分是蛋白质和脂肪,其比例约为1:2。大部分蛋白质是脂蛋白,存在于卵黄颗粒中,不溶于水,只有卵黄球蛋白是水溶性的,IgY是一种C-卵黄球蛋白。因此如何去除高浓度的脂类是IgY提纯的关键。IgY分离纯化的原则是简便、高效、经济。
目前常用的分离方法主要有:机物沉淀法、有剂溶剂沉淀法、有氨基酸盐或硫酸钠法、聚乙烯醇(PEG)法、辛酸法、水稀释法(WD法)、超临界气体提取法(SFE法)、去污剂分离法等。
上述常用的分离方法的缺点主要有以下几点:
1)有机物沉淀法、有剂溶剂沉淀法、有氨基酸盐或硫酸钠法、聚乙烯醇(PEG)法、辛酸法、水稀释法(WD法)、超临界气体提取法(SFE法)、去污剂分离法,这些方法最大的缺点是消耗大量的机物、有剂溶剂;
2)水稀释法,稀释倍数大,分离效果不理想,超临界气体提取法需设备投资大,成本高等缺点;
3)有机物沉淀法、有剂溶剂沉淀法,有机物存在沉淀物中,不利卵黄沉淀物的进一步加工和利用。
发明内容
本发明要解决的技术问题是提供一种以冷冻法去除鹅、鸭卵黄中的脂蛋白及脂质的方法。该方法无需使用任何有机物、有剂溶剂,能显著降低成本,而且卵黄中分离出来脂肪及脂蛋白因无其它有机物、有剂溶剂可以作为食品原料充分利用。
为了解决上述技术问题,本发明采用的技术方案是:一种去除鹅、鸭卵黄中的脂蛋白及脂质的方法,包括以下步骤:
(1)取经过鹅疫苗强化免疫过的鹅或鸭所产鲜蛋,清洗消毒;
(2)分离蛋白,蛋黄;
(3)按体积取分离后的蛋黄1份。加入3倍等体积的蒸馏水稀释、搅匀,在-18℃条件下冻存24小时及以上,确保冻实;
(4)取出冻实的蛋黄经解冻、滤过,得无色透明的滤液,即可用于免疫球蛋白IgY纯化。
作为优选,步骤(1)中所述鹅疫苗为小鹅瘟疫苗、鹅鹅副粘病毒或禽流感疫苗。
本发明的有益效果是:
(1)本分离方法无需使用任何有机物、有剂溶剂,能显著降低成本;
(2)卵黄中分离出来脂肪及脂蛋白因无其它有机物、有剂溶剂可以作为食品原料充分利用。
通过冷冻物理的分离方法卵黄沉淀得到充分利用,不用化学有剂溶剂能显著降低成本。
具体实施方式
一种以冷冻法去除鹅、鸭卵黄中的脂蛋白及脂质的方法,具体步骤如下:
将经过小鹅瘟疫苗强化免疫过的鸭所产鲜蛋清洗消毒,分离蛋白,蛋黄,按体积取1份蛋黄加入3倍等体积的蒸馏水稀释,搅匀,装入塑料桶中,-18℃冻存24小时及以上并确保冻实,既可拿出解冻,滤过,得无色透明的滤液,可用于下一步的免疫球蛋白IgY纯化,亦可加入防腐剂做为药用。
表1是以100枚鸭蛋为例所得的提取结果。
表1鸭蛋加水量与提取液的关系
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