[发明专利]利用啤酒厂废水培养雨生红球藻的培养基及培养方法

权利要求书

1.一种利用啤酒厂废水培养雨生红球藻的培养基，其特征在于配方如下：

啤酒厂废水80毫升，柠檬酸三钠28毫克，尿素20毫克，磷酸二氢钾12毫克，果糖150毫克，酵母浸粉45毫克，胰酪蛋白胨50毫克，柠檬酸铵12毫克，乳清粉25毫克，乳糖30毫克，葡萄糖60毫克，马粪浸出液1.8毫升，豆汁2毫升，山梨醇100毫克，可溶性淀粉24毫克，大豆胨25毫克，β-甘油磷酸钠28毫克，乙二胺四乙酸12毫克，维生素B₁10微克，维生素B₁₂1微克，土壤抽出液1.8毫升，人尿1.5毫升，鸡粪浸出液2.4毫升，次氯酸钠消毒后的纯净淡水1000毫升。

2.一种利用啤酒厂废水培养雨生红球藻培养方法，其特征在于具体步骤如下：

培养容器为卧式蓄水罐，容积1.5立方米，高密度聚乙烯材料制成，白色，有较好的透光性，以利藻类进行光合作用，蓄水罐为一体式构造，具有很大的强度和坚固性且设计为平底，以便安装在硬质水泥地面上，蓄水罐顶部有一圆形盖子，上有旋丝，可旋转而密封，盖子直径35厘米，盖子打上2个孔，一个孔插入充气管，另一个孔插入排气管，充气管和排气管都是玻璃管，内径10毫米，将反应器洗刷干净，后用蒸馏水润洗3遍，装入权利要求1所述的培养基900升，充气混合5分钟，选择生命力旺盛、无污染的雨生红球藻接种，接种密度2×10⁴cell/mL，盖子上插入两根干净玻璃管，一根较长，35厘米，顶端露出盖子12厘米，下端通过料管与散气石连接，用以充气，所述散气石的作用是形成很小的气泡，避免大气泡或翻滚的波浪打碎藻细胞；另一根较短，16厘米，两端露出盖子即可，用以排气，两根玻璃管同样粗细，内径10毫米，用干净的透明胶带将两根玻璃管固定，长的玻璃管上端用料管与充气泵相连，充入混合气体，混合气体成分和体积比例是空气∶纯二氧化碳∶二氧化硫∶苯乙烯＝92％∶6％∶1％∶1％，连续充气，充气量不宜太大，以藻细胞浮起不下沉即可，室外培养，太阳光照射，最佳温度23±2℃，最佳光照强度3000-8000Lux；培养的前5天，蓄水罐上方搭建一简易棚，上放置帘子遮挡光线，较弱的光照有利于营养细胞的生长和繁殖，第6天撤掉帘子，强光照射有利于虾青素的合成和积累；培养至第7天，停止充气，拿开盖子，补充新鲜培养基50升，盖上盖子，充气，继续培养，至第9天，雨生红球藻密度增加至60×10⁴cell/mL，停止培养，从底部的水龙头放出藻液，将反应器洗刷干净后，加入中药消毒液消毒30分钟，后进入下一轮培养；

所述中药消毒液由以下重量比的物质组成：每100份85％乙醇中加入以下重量份的中药材：板蓝根30～50份、柴胡15～25份、薄荷15～25份、栀子5～15份、艾叶5～15份，中药消毒液制作方法：将新鲜板蓝根、柴胡、薄荷叶、艾叶、山栀果切碎，于60-70℃下烘干，再用中药材粉碎机分别粉碎至70目备用，用托盘天平分别称取烘干并粉碎的板蓝根120克，柴胡60克，薄荷叶60克，艾叶30克，山栀果30克，置于三角烧瓶中充分混合后，加入1000毫升85％ 乙醇，浸泡48小时，200筛绢过滤，将清液静置沉淀36小时，撇去液面漂浮物，取中上层的清液，即为复方中药消毒液，密封于黑色试剂瓶中，贴上标签，置于4℃冰箱备用。

3.根据权利要求2所述的一种利用啤酒厂废水培养雨生红球藻培养方法，其特征在于，对选用的所述的反应器，洗刷干净后进行消毒，使用紫外灯消毒，消毒10-20分钟。

4.根据权利要求2所述的一种利用啤酒厂废水培养雨生红球藻培养方法，其特征在于，对选用的所述的反应器，洗刷干净后进行消毒，使用高压氮气喷射消毒，消毒5-10分钟。

5.根据权利要求2所述的一种利用啤酒厂废水培养雨生红球藻培养方法，其特征在于，对选用的所述的反应器，洗刷干净后进行消毒，使用高压二氧化碳喷射消毒，消毒5-6分钟。

6.根据权利要求2所述的一种利用啤酒厂废水培养雨生红球藻培养方法，其特征在于，对选用的所述的反应器，洗刷干净后分两个阶段消毒，先使用高压氮气喷射消毒，消毒2-3分钟，使用高压二氧化碳喷射消毒，消毒2-3分钟，消毒完毕后再进行藻类培养。