[发明专利]一种CD20核酸适配体及其应用

说明书

一种CD20核酸适配体，其特征在于，该适配体由SEQ No.1所示的序列组成。在该适配体的两端可进行基团修饰，所述基团为氨基、氨基、羧基、巯基、荧光分子、胆固醇或聚乙二醇的任一种或多种；所述适配体的碱基可做任何修饰，所述修饰为硫代、氨基、氟基、甲氧基或羧基任一种或多种修饰。上述核酸适配体在制备用于检测和/或治疗CD20阳性肿瘤制剂中的应用。制备的治疗CD20阳性肿瘤制剂能选择性的结合CD20阳性的肿瘤细胞，而与CD20阴性的细胞结合较弱。

技术领域

本发明属于生物技术领域，具体地说，本发明涉及CD20核酸适配体，以及所述适配体在制备治疗CD20阳性肿瘤药物中的应用及其在制备检测和/或治疗CD20阳性肿瘤细胞制剂中的应用。

背景技术

非霍奇金淋巴瘤(NHL)是世界上严重威胁人类健康的肿瘤之一，在过去的50年中，NHL在世界范围内有着稳定的增长趋势，不容忽视。据统计，它占所有癌症病例数的5.1％，在男性常见肿瘤中排名第八位，在女性中是第11位。2008年，共有355900新增NHL病例，造成了191400人的死亡。已有研究表明，大多数的NHL来源于B细胞。NHL可在不同的年龄阶段发生，尤其是在60岁以上的人群身上。

临床上治疗NHL的传统方法就是化疗。然而，由于细胞毒药物在杀伤肿瘤细胞的同时也会对正常组织产生损伤，从而限制了化疗的进度和用药程度，所以化疗很难将患者体内肿瘤细胞完全去除，导致了肿瘤的复发或者转移。并且，多重化疗药物联合使用会使患者对药物产生耐药性。所以亟需研发新型的针对NHL的治疗手段。

近些年靶向治疗得到了人们的关注。靶向治疗是指将抗肿瘤药物通过靶向分子特异性地呈递到肿瘤细胞上，使得药物在肿瘤组织上有更高的富集而在正常组织中含量很少，则药物对肿瘤组织的杀伤增强而对正常组织杀伤较弱，从而有助于清除体内的肿瘤细胞，并大大降低毒副作用。靶向治疗是有希望改善抗肿瘤化疗疗效的重要方向之一。

靶向治疗系统的构建，需要靶向分子和抗肿瘤药物。其中，靶向分子可以与肿瘤细胞上的肿瘤靶点特异结合。一个理想的肿瘤靶点应在肿瘤细胞膜表面高表达，而在正常组织或阴性组织中低表达或不表达。CD20是一个33-37kDa的膜蛋白，它的表达严格遵循B细胞造血系统。CD20抗原表达于90％以上的B淋巴瘤细胞，而不表达于造血干细胞、原始B淋巴细胞、正常血细胞以及其他正常组织。由于80％-85％的NHL来源于B细胞，并且这些细胞中将近95％的细胞高表达CD20，所以CD20是靶向治疗NHL的重要靶点。

美罗华是一个CD20的单克隆抗体，它是首个被FDA批准的靶向治疗NHL的药物。尽管美罗华临床上产生了一定的疗效，但是它仍有一些弊病，比如一些患者对其不敏感，且一些患者使用一段时间后药物则不再有疗效，并对进一步的治疗产生了抵抗反应。故此，研发一种新型的靶向CD20阳性NHL的治疗策略是很必要的。

近些年，除了单克隆抗体，一些其他类别的靶向分子也得到了人们的关注。核酸适配体(aptamer)就是其中之一。核酸适配体是一段短链的DNA或RNA，它们可通过碱基之间的配对以及相互作用产生特有的三维结构，从而与靶标高亲和、高特异地结合。同时，与抗体相比，核酸适配体还有一些独特的优势，如可大批量合成、成本低、易修饰、易穿透肿瘤组织、免疫原性低等等。因此，核酸适配体在肿瘤的靶向治疗有重要的应用潜能。然而。到目前为止，科学文献中还没有报导过针对CD20的核酸适配体。

发明内容

本发明的目的是提供一种新的CD20核酸适配体，所述核酸适配体能够与CD20表位肽及CD20阳性的肿瘤相结合，所述核酸适配体包括如下核酸序列(SEQ ID NO：1)：5’-TGCGTGTGTAGTGTGTCTGTGTGTGTGTAGCGTGTCTGCTCTTAGGGATTTGGGCGG-3’(下文中，也将该核酸适配体称为“CZ17”)。