[发明专利]一种远志糖酯有效部位的制备方法

说明书

技术领域

本发明属于中药领域，涉及一种中药有效部位的制备方法，尤其涉及一种远志糖酯有效部位的制备方法。

背景技术

远志是远志科植物远志Polygala tenuifolia Willd.或卵叶远志Polygala sibirica L.的干燥根，具有安神益智、交通心肾、祛痰消肿的功效，临床用于治疗心肾不交引起的失眠多梦、健忘惊悸、神智恍惚、咳痰不爽、疮疡肿毒、乳房肿痛。化学成分研究表明，远志所含化学成分主要为皂苷、糖酯、                                                酮、生物碱和脂肪油等。现代药理学研究表明，远志皂苷具有祛痰止咳的作用，也是远志的主要毒性成分（具有明显的胃刺激作用和溶血作用）；远志酮具有抗真菌和止痛的作用；远志糖酯被认为与远志改善认知和脑保护作用有关。Ikeya等（Biol. Pharm. Bull., 2004, 27(7), 1081-1085.）研究发现，远志糖酯能显著缩短KCN致脑缺血小鼠昏迷时间，其中以3, 6’-二芥子酰基蔗糖酯（DISS）和Tenuifoliside B的活性最好，进一步研究还发现这两个化合物还具有较好的改善认知活性（东莨菪碱致小鼠痴呆模型）。

已有学者对远志活性部位的制备工艺进行了研究。姜勇等（中国专利，CN 1640425 A）公开了一种远志有效部位的制备方法，具体方法如下：将远志的根或根皮粉碎后，先使用水或/和醇作进行提取，然后上大孔树脂柱，使用水、甲醇、乙醇、丙酮、或50～95 ％的乙醇或丙酮的水溶液进行洗脱，收集洗脱液，干燥，即得含量达50％以上的远志总苷有效部位。该总苷有效部位以DISS为对照品，采用紫外分光光度法测定总苷含量，总苷含酮苷、糖酯和皂苷。然而，该总苷的三类成分最大紫外吸收波长差别大，分子量差别大（酮苷分子量范围：200-600；糖酯分为蔗糖单酯、蔗糖双酯、寡糖多酯，其分子量范围为：500-1500；皂苷分子量范围：1000-2000），因此，简单地以DISS为对照品，采用紫外分光光度法测定远志总苷含量，其专属性和准确度还有待进一步验证。其次，由于总苷含有的酮苷、糖酯和皂苷三类成分的药理作用不同，这种混合的有效部位影响其在新药研发中的应用。王磊等（中国专利，CN 102526215 A；CN 102451442 A）公开了一种去除远志毒性成分保留有效组分的提取工艺。该学者采用AB-8大孔吸附树脂对远志提取物进行了纯化，去除所含的胃刺激成分皂苷，保留了糖酯和酮等成分，但该方法未对所得提取物进行质量控制，提取物中可控成分含量不明，不符合我国药品注册法规对有效部位（即中药五类）新药的要求，只能作为一般粗提取物应用。

发明内容

本发明的目的是提供一种远志糖酯的制备方法，通过以下步骤实行：

（1）提取：以远志药材为原料，采用乙醇溶液回流法进行提取，具体为：以远志药材质量6~12倍量的50~80 %乙醇溶液为提取溶剂，回流提取2~3次，每次1-2 h，合并提取液，60 ℃减压浓缩至无醇味，得到远志提取物。

（2）大孔树脂纯化：采用D130大孔树脂对步骤（1）所得的远志提取物进行纯化。上样液的浓度为含生药0.25 g/ml，上样速度为2~3 Bv/h，上样量为2~4 Bv；在洗脱过程中先用4~6 Bv的水进行冲洗，水洗速度为4 Bv/h，接着用4~6 Bv的浓度为20 %的乙醇溶液进行洗脱，洗脱速度为2 Bv/h，然后用4~6 Bv的浓度为35 %的乙醇溶液进行洗脱，洗脱速度为1~3 Bv/h。35 %乙醇溶液洗脱液，减压浓缩至无醇味（60 ℃），得到糖酯富集部位。

（3）乙酸乙酯萃取：采用液液萃取的方法对步骤（2）所得的糖酯富集部位进行纯化，糖酯富集部位加水分散得到样液，浓度为含糖酯1.36~13.61 mg/ml，萃取溶剂为乙酸乙酯，萃取次数3~5次，每次萃取溶剂用量为3倍样液量。合并乙酸乙酯层，减压浓缩至干（60 ℃），即得远志糖酯有效部位。

进一步地，步骤（1）提取溶剂的用量为远志药材质量的8倍，乙醇溶液的浓度为70 %，回流提取2次，每次1.5 h。

进一步地，步骤（2）中上样速度为2 Bv/h，上样量为4 Bv。较优的洗脱过程为：先用5 Bv的水进行冲洗，水洗速度为4 Bv/h，接着用5 Bv的浓度为20 %的乙醇溶液进行洗脱，然后用6 Bv的浓度为35 %的乙醇溶液进行洗脱，洗脱速度为2 Bv/h。

进一步地，步骤（3）中样液的浓度为含糖酯6.81 mg/ml，萃取次数为4次。