[发明专利]一种叶酸和TAT肽共修饰的载药脂质体及其制备方法

说明书

技术领域

本发明属于药物载体领域，特别涉及一种叶酸和TAT肽共修饰的载药脂质体及其制备方法。

背景技术

纳米载体在化疗药物肿瘤选择性递送中显示出巨大潜力，值得关注的是，这种借助纳米技术治疗的方式取得的抗肿瘤效果仍然非常有限，其原因很可能是由于纳米载体不够高效地将化疗药物输送进入肿瘤细胞，限制了化疗药物抗肿瘤活性的发挥。纳米载体透过血管进入肿瘤间质主要通过对流和扩散的方式。与此同时，肿瘤间质中较高的组织间隙压（IFP）促使组织液反向流动到周围组织中，从而妨碍了纳米载体渗透到实体肿瘤内部。透过肿瘤血管间隙和窗孔的纳米载体如能快速被肿瘤细胞摄取，那么IFP所引起的负影响将被缓解。有鉴于此，基于大多数肿瘤细胞表面高度表达一些特异性受体，配体修饰的策略已被广泛采用，连接配体的纳米载体可通过受体-配体介导的内吞被肿瘤细胞选择性摄取。然而，肿瘤细胞表面受体的表达量并不恒定，另外受体-配体介导的细胞内吞存在饱和现象，导致配体修饰的纳米载体改善肿瘤治疗的效果依旧有限。

TAT肽为细胞穿透肽（Cell penetrating peptides，CPPs）中的一种，能够携带多种不同大小和性质的生物活性物质进入细胞，包括小分子化合物、染料、多肽、多肽核酸、蛋白质、质粒DNA、siRNA、200 nm的脂质体、噬菌体颗粒和超顺磁性粒子等，实现治疗药物的细胞跨膜转运。虽然现有的细胞穿透肽跨膜转运作用的确切机制尚不清楚，但许多研究已表明细胞穿透肽氨基酸序列中的碱性氨基酸发挥了主要作用。然而，由于细胞穿透肽缺乏足够的细胞选择性，一定程度上限制了它在药物靶向输送方面的应用。

发明内容

叶酸（Folic acid）是一种水溶性的维生素，为人体必需的微量元素，研究表明大多数实体瘤肿瘤细胞表面广泛表达叶酸受体，因此叶酸常被用作肿瘤靶向的配体。为克服叶酸修饰的纳米递药载体在药物靶向递送中存在的上述不足，本发明提供了一种叶酸和TAT肽共修饰的载药脂质体及其制备方法，以期实现抗肿瘤药物的高效肿瘤细胞内递送。

本发明的目的可以通过以下技术方案实现：

    一种叶酸和TAT肽共修饰的载药脂质体，组分包括脂质体、长链靶向膜材、短链靶向膜材和药物，所述的脂质体主要成分为磷脂和胆固醇。

    所述叶酸和TAT肽共修饰的载药脂质体，包含以下重量份的组分制成：

    脂质体       1 份；

    长链靶向膜材      1- 10份；

    短链靶向膜材    1-5份；

    药物          0.01 -0.2份。

    所述长链靶向膜材为二硬脂酰磷脂酰乙醇胺-聚乙二醇-叶酸（DSPE-PEG-FA），所述短链靶向膜材为二硬脂酰磷脂酰乙醇胺-聚乙二醇-TAT（DSPE-PEG-TAT）。

    所述长链靶向膜材中的PEG重均分子量选自1000、2000、3400或5000；短链靶向膜材中的PEG重均分子量选自750、1000、2000或3400；所述长链靶向膜材中PEG重均分子量大于短链靶向膜材中PEG重均分子量。

    所述脂质体中磷脂选自磷脂豆磷脂、卵磷脂、氢化大豆卵磷脂、二棕榈酰磷脂酰胆碱、二硬脂酰磷脂酰胆碱、磷脂酰乙醇胺、二油酰基磷脂酰乙醇胺、磷脂酰甘油、琥珀酸胆固醇酯和磷脂酰丝氨酸中的一种或一种以上。

所述药物为紫杉醇、多西他赛、阿霉素、羟基喜树碱、盐酸阿霉素、顺铂、两性霉素B、柔红霉素、胞嘧啶、阿糖胞苷、长春新碱、依托泊苷和伊达比星中一种或几种。

所述磷脂与胆固醇的质量比为4-5：1。

    一种叶酸和TAT肽共修饰的载药脂质体的制备方法，该方法包括如下步骤：

(1)称取磷脂、胆固醇、长链靶向膜材、短链靶向膜材及药物，用有机溶剂溶解，随后在40℃条件下减压旋干有机溶剂，得到含药脂膜;

(2)向含药脂膜中加入磷酸盐缓冲溶液中溶解，超声2分钟，用0.22 μm膜，过滤10次，得到双靶载药脂质体。

一种叶酸和TAT肽共修饰的载药脂质体的制备方法，该方法包括如下步骤：

（1）称取磷脂、胆固醇及药物，用有机溶剂溶解，在40℃条件下减压旋干有机溶剂，得到含药脂膜;

(2)向含药脂膜中加入磷酸盐缓冲溶液中溶解，超声2分钟，用0.22 μm膜，过滤10次，得到载药脂质体；