[发明专利]高通量多通道低丰度生物分子的磁传感识别方法有效
| 申请号: | 201410213233.X | 申请日: | 2014-05-20 | 
| 公开(公告)号: | CN104034881A | 公开(公告)日: | 2014-09-10 | 
| 发明(设计)人: | 章伟;胡雪峰 | 申请(专利权)人: | 南京益得冠电子科技有限公司 | 
| 主分类号: | G01N33/53 | 分类号: | G01N33/53;G01N27/72 | 
| 代理公司: | 南京经纬专利商标代理有限公司 32200 | 代理人: | 邓唯 | 
| 地址: | 210009 江苏*** | 国省代码: | 江苏;32 | 
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| 摘要: | |||
| 搜索关键词: | 通量 通道 低丰度 生物 分子 传感 识别 方法 | ||
1.一种高通量多通道低丰度生物分子的磁传感识别方法,其特征在于,包括如下步骤:
第1步、磁纳米粒子的表面修饰:在磁纳米粒子上包覆壳层,所述的壳层的材料是惰性金属、高分子聚合物或者二氧化硅,得到表面修饰的磁纳米粒子;
第2步、磁粒子的表面生物功能化:在第1步所得的表面修饰的磁纳米粒子上包覆上链霉亲和素,得到探测探针;
第3步、磁传感器薄膜的沉积:利用薄膜真空沉积方法制作磁传感器薄膜;
第4步、磁传感器微纳米制造:将磁传感器薄膜制造成传感器阵列,并在传感器的两端安装钉扎层器件结构;
第5步、标定磁传感器的磁电阻:对第4步制得的传感器进行磁电阻的测定;
第6步、磁量子传感器的表面修饰:在磁传感器上依次进行金属氧化物和高分子多表面层的修饰,再在高分子多层表面层上键合要检测的生物分子抗原对应的抗体,得到键合抗体的磁量子传感器;
第7步、生物分子与传感器的偶联:将设定浓度的需要检测的生物分子作为抗原偶联在第6步所得的磁量子传感器的抗体上;
第8步、分析抗体与生物素的偶联:将要检测的生物分子抗原对应的抗体与生物素偶联;
第9步、将第8步得到的偶联生物素的抗体与第7步所得的磁量子传感器通过抗原-抗体结合,得到有抗体-抗原-生物素偶联抗体的磁量子传感器;
第10步、探测探针的偶联:将第2步得到的探测探针偶联至第9步中得到有生物素偶联的抗体上;
第11步、偶联和非偶联磁性探针的磁分离:开启磁场,将没有和有生物素偶联的磁量子传感器偶联的探测探针从传感器表面分离;
第12步、标准曲线的绘制以及生物分子的测定:测定第11步所得的磁量子传感器的磁电阻,与事先在第5步标定的磁电阻进行比较,得到来自磁探针的响应;
第13步、改变抗原的浓度,重复第7步-第12步,得到抗原的浓度与磁电阻值之间关系的标准曲线;
第14步、对待测样本进行测定,通过标准曲线计算得到待测样本中抗原的浓度。
2.根据权利要求1所述的高通量多通道低丰度生物分子的磁传感识别方法,其特征在于,所述的生物分子是可以通过免疫学方法连接的生物大分子、生物标记物、细菌、激素或者农药。
3.根据权利要求1所述的高通量多通道低丰度生物分子的磁传感识别方法,其特征在于:所述的磁纳米粒子是指:超顺磁性Fe3O4或者MFe2O4,所述的M是指Mn、Mg、Fe、Co、Ni或者Zn中的一种;或者是铁磁性的金属元素或者其合金,所述的合金是指:FeCo、FeNi、CoNi或者FeCoNi。
4.根据权利要求1所述的高通量多通道低丰度生物的磁传感识别方法,其特征在于,所述的第2步中,是通过AEAPS磁性纳米粒子表面偶联方法进行链霉亲和素的包覆。
5.根据权利要求1所述的高通量多通道低丰度生物分子的磁传感识别方法,其特征在于:所述的磁传感器是各向异性磁电阻传感器、电线圈感应传感器、巨磁阻传感器或者自旋电子隧穿传感器中的一种。
6.根据权利要求1所述的高通量多通道低丰度生物分子的磁传感识别方法,其特征在于:第3步中,通过等离子化学气相沉积法在磁传感器上修饰金属氧化物层;通过聚烯丙基胺溶液化学反应方法沉积高分子层。
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