[发明专利]抗菌肽C-BF保护小鼠溃疡性结肠炎模型无效

专利信息
申请号: 201410212571.1 申请日: 2014-05-16
公开(公告)号: CN104031883A 公开(公告)日: 2014-09-10
发明(设计)人: 汪以真;张海文;戎亦骊 申请(专利权)人: 浙江大学
主分类号: C12N5/09 分类号: C12N5/09;A01K67/027;A61D7/00
代理公司: 杭州求是专利事务所有限公司 33200 代理人: 林松海
地址: 310027 浙*** 国省代码: 浙江;33
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摘要:
搜索关键词: 抗菌 bf 保护 小鼠 溃疡性 结肠炎 模型
【权利要求书】:

1.一种抗菌肽C-BF保护小鼠溃疡性结肠炎模型,其特征在于,

1)建立3%葡聚糖硫酸钠(DSS)诱导小鼠溃疡性结肠炎模型;

2)直肠注射C-BF的PBS溶液,每天一次,C-BF的剂量是5mg/kg,注射持续1周,实验期每天称重记录体重数据,并观察小鼠直肠出血,粪便成型情况。

2.根据权利要求1所述的抗菌肽C-BF保护小鼠溃疡性结肠炎模型,其特征在于,进一步,

3)荧光标记C-BF,浓度为2mg/ml,直肠注射,通过活体成像、HE染色、免疫荧光、免疫组织化学、流式细胞仪、Tunnel、ELISA、Western-blot、实时荧光定量PCR技术方法,评价C-BF对DSS诱导的小鼠溃疡性结肠炎的在缓解炎症、降低细胞凋亡水平以及改善肠道屏障功能的作用。

3.根据权利要求2所述的抗菌肽C-BF保护小鼠溃疡性结肠炎模型,其特征在于,所述的作用如下:

与DSS组相比,C-BF+DSS组结肠上皮形态得到缓解,血液中B、T、巨噬细胞的比例恢复到正常水平,血清中促炎性细胞因子TNF-α,IL-6,IL-8和抗炎因子IL-10的蛋白水平以及这些细胞因子的mRNA水平显著降低;与DSS组相比,C-BF+DSS组细胞凋亡指标和炎症细胞巨噬细胞和中性粒细胞浸润指数在结肠上皮细胞明显减弱,炎症相关的COX-2和INOS的酶活性明显下降;与DSS组相比,回肠中段sIgA的分泌量和血清中Ig A,G,M的分泌量明显升高;C-BF能有效降低肠道通透性增加和显著上调由DSS引起的屏障功能相关基因表达水平,C-BF可以通过调节肠道免疫功能和增强肠粘膜屏障功能减轻DSS诱导的溃疡性结肠炎。

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