[发明专利]修饰植物基因组的方法和手段

权利要求书

1.包含嵌合基因的棉花植物细胞、植物部分、植物或种子，所述嵌合基因包含

(a)编码具有HPPD活性的蛋白质的核酸序列，其中所述蛋白质在对应于SEQ ID NO:19的位置336的位置上具有色氨酸，其中所述蛋白质向所述植物提供对至少1X田间剂量的至少一种HPPD抑制剂的耐受性，所述核酸序列有效连接

(b)植物可表达的启动子和任选地

(c)翻译终止和多腺苷酸化区。

2.权利要求1的棉花植物细胞、植物部分、植物或种子，其中所述蛋白质与SEQ ID NO:21的氨基酸序列具有至少95％的序列同一性。

3.权利要求1或2的棉花植物细胞、植物部分、植物或种子，其中优化编码具有HPPD活性的蛋白质的所述核酸序列用于在棉花中表达。

4.权利要求1-2任一项的棉花植物细胞、植物部分、植物或种子，其中所述蛋白质包含SEQ ID NO:21的氨基酸序列或由包含SEQ ID NO:20从nt949-nt2025的核苷酸序列的核酸编码。

5.权利要求1-4任一项的棉花植物细胞、植物部分、植物或种子，其对至少1.5X田间剂量的所述至少一种HPPD抑制剂具有耐受性。

6.权利要求1-5任一项的棉花植物细胞、植物部分、植物或种子，其对至少2X田间剂量的所述至少一种HPPD抑制剂具有耐受性。

7.权利要求1-6任一项的棉花植物细胞、植物部分、植物或种子，其中所述至少一种HPPD抑制剂选自甲基磺草酮、异氟草、苯吡唑草酮、pyrasulfutole和环磺酮。

8.权利要求7的棉花植物细胞、植物部分、植物或种子，其对至少两种HPPD抑制剂，优选至少三种HPPD抑制剂，更优选至少四种HPPD抑制剂，如至少5种或至少6种HPPD抑制剂耐受。

9.权利要求1-8任一项的棉花植物细胞、植物部分、植物或种子，其中所述嵌合基因包含SEQ ID NO:20从位置88-位置2714的核酸序列。

10.用于获得对至少1X田间剂量的至少一种HPPD抑制剂耐受的棉花植物或植物细胞的方法，其包括

-导入嵌合基因，其包含：

(a)编码具有HPPD活性的蛋白质的核酸序列，其中所述蛋白质在对应于SEQ ID NO:19的位置336的位置上具有色氨酸，其中所述蛋白质向所述植物提供对至少1X田间剂量的至少一种HPPD抑制剂的耐受性，所述核酸序列有效连接

(b)植物可表达的启动子和任选地

(c)翻译终止和多腺苷酸化区。

11.用于控制棉花植物附近或植物田地中杂草的方法，其包括

-向棉花植物附近或棉花植物田地应用至少1X田间剂量的至少一种HPPD抑制剂。

12.权利要求10或11的方法，其中所述至少一种HPPD抑制剂选自甲基磺草酮、异氟草、苯吡唑草酮、pyrasulfutole和环磺酮。

13.权利要求10-12任一项的方法，其中以至少1.5X、至少2X或至少4X的田间剂量应用所述至少一种HPPD抑制剂。

14.权利要求10-13任一项的方法，其中所述至少一种HPPD抑制剂是异氟草和甲基磺草酮，其中所述异氟草在出苗前应用，而所述甲基磺草酮在出苗后应用。

15.编码具有HPPD活性的蛋白质的核酸序列产生棉花植物或其植物细胞、植物部分或种子的用途，其中所述蛋白质在对应于SEQ ID NO:19的位置336的位置上具有色氨酸，所述棉花植物对至少1X田间剂量的至少一种HPPD抑制剂耐受。