[发明专利]靶向IFNAR2基因的RNA干扰表达载体构建及应用

权利要求书

1.靶向IFNAR2基因的siRNA，其特征在于：编码所述siRNA的DNA序列选自如下核苷酸序列：

siE1:5′-CTAACAGATGTGTGGATAA-3′；

siE2:5′-CGAATAAAGGGAAACATCA-3′；

siE3:5′-GATGAATCTTGCACTTTAA-3′。

2.针对IFNAR2基因的shRNA，其特征在于：编码所述shRNA的DNA序列为：SEQ ID No.1和2，SEQ ID No.3和4，或SEQ ID No.5和6退火形成的双链。

3.含有权利要求1所述的siRNA或权利要求2所述shRNA的siRNA表达载体。

4.根据权利要求3所述的siRNA表达载体，其特征在于：其源自pSilencer4.1-CMV neo。

5.根据权利要求4所述的siRNA表达载体，其特征在于：其为pSiCMVE1、pSiCMVE2或pSiCMVE3。

6.权利要求3～5任一项所述的siRNA表达载体的构建方法，其特征在于包括如下步骤：

(1)将权利要求1所述的siRNA的DNA序列和其互补序列用loop结构序列连接形成正义链，在正义链的两端引入接头序列；

(2)根据步骤(1)的正义链得到其反义链，并在其两端引入接头序列；

(3)将步骤(1)和(2)得到的序列在溶液中退火，形成shRNA；

(4)将shRNA插入线性化的siRNA表达载体中，得到表达siRNA的表达载体。

7.根据权利要求6所述的构建方法，其特征在于，步骤(1)中所述的5′引入的接头序列为5′-GATCC-3′，3′引入的接头序列为5′-TTA-3′。

8.根据权利要求6所述的构建方法，其特征在于，步骤(2)中所述的5′引入的接头序列为5′-AGCTTAA-3′，3′引入的接头序列为G。

9.根据权利要求6所述的构建方法，其特征在于，所述的loop结构序列为5′-TTCAAGAGA-3′。

10.权利要求1所述的siRNA、权利要求2所述的shRNA或权利要求3～5所述的siRNA表达载体在抑制IFNAR2基因表达中的应用。