[发明专利]一种荔枝核滴丸质量检测方法

说明书

技术领域

本发明属于药物质量控制领域，具体涉及一种荔枝核滴丸质量检测方法，特别是一种测定荔枝核滴丸中原花青素含量的方法。

背景技术

原花青素是植物中广泛存在的一大类多酚化合物的总称,主要由不同数量的儿茶素和表儿茶素的单体、二聚体、三聚体到十聚体组合而成，拥有较强的氧化和清除自由基的能力及改善人体微循环的功效。现代药理研究表明,原花青素还具有消炎、抗肿瘤、抗辐射、抗衰老、改善免疫力、改善骨的形成、抗糖尿病、降血脂、降血压、促进伤口愈合和组织修复活性及抗癌作用(凌志群等，原花青素的药理学研究进展《中国药理学通报》,2002年，18卷，第1期:9-12)。初步发现荔枝核中也含大量的原花青素(丁丽等，荔枝核化学成分的研究，《天然产物研究与开发》,2006年,18卷，第6期:45-47)。

中国专利申请CN102836265公开了一种制备荔枝核滴丸制备工艺，工艺为：将荔枝核药材粉碎，加入8～10倍药材量的70v/v％乙醇进行超声提取2次，每次1小时；合并2次的提取液减压回收乙醇至无醇味后用蒸馏水稀释以生药量计浓度为0.4g/ml，静置过夜；过滤，滤液通过AB-8大孔树脂吸附，先用水洗脱，继用75v/v％乙醇洗脱，收集乙醇洗脱液；回收乙醇，继续浓缩至稠膏后真空低温干燥，即得荔枝核提取物；按1:4量分别称取荔枝核提取物和基质(聚乙二醇4000和聚乙二醇6000配比为1:2混合物)；将所述基质加热至熔融，边搅拌边加入荔枝核提取物，混匀，将所得混合液加入滴丸机贮液罐，保温75℃，通过滴头匀速滴入装有冷却剂的收集器中，所述冷却剂的保温温度为5℃，滴制完后，取出药丸，筛选出合格的药丸，除去表面冷却剂，真空室温干燥过夜，即得荔枝核滴丸。为保证药物的安全、有效、稳定，有必要对滴丸中原花青素含量进行监控。

目前，现有文献对荔枝核原花青素成分的含量测定普遍是采用“铁盐催化比色法”，原理是利用酚羟基特点，与铁离子螯合产生颜色而进行，因为较多的中药成分均具有该种酚羟基，因此这种方法专属性较差。因此，建立一种能准确检测荔枝核滴丸原花青素含量的质量检测方法具有现实的意义。

发明内容

为了解决上述技术问题，本发明的目的在于提供一种专属性好、有效、稳定、能够迅速、灵敏地测定荔枝核滴丸中原花青素含量的方法，从而有效检测荔枝核滴丸的质量。

因此，本发明提供了一种荔枝核滴丸质量检测方法，包括以下步骤：

1)取原花青素对照品，加入甲醇溶解、定容、摇匀，制成每毫升含原花青素1.15mg的对照品溶液；

2)取荔枝核滴丸，研碎，精密称定0.5g，加入40mL体积浓度为70％的丙酮进行超声提取30min，滤过，残渣用体积浓度为70％的丙酮洗涤，合并滤液进行水浴加热挥干丙酮，残渣用甲醇溶解并转移至25mL量瓶中，并以甲醇稀释至刻度，摇匀，用0.2μm微孔滤膜滤过，将续滤液作为供试品溶液；

3)精密吸取步骤1)的对照品溶液0.5、1、3、5、10、20μL进样，测定峰面积；得标准曲线方程：A＝1012.25C-567.89，R²＝0.9986；精密吸取步骤2)的供试品溶液10μL，进样，测定峰面积，代入上述标准曲线方程计算得到荔枝核滴丸中的原花青素含量。

根据本发明的方法，优选地，所使用的色谱柱为CAPCELL PAK C₁₈UG120S3，规格为4.6mm×100mm,5μm；流动相为乙腈-0.1％磷酸(10:90)，流速为1.0mL/min，柱温为30℃；检测波长为280nm，理论塔板数按原花青素计算至少为2000。

与现有技术中的传统检测方法相比，本发明提供了一种新的荔枝核滴丸质量检测方法，该方法基于高效液相色谱，步骤设计合理，通过适当的预处理，能够有效去除荔枝核滴丸中的杂质，使样品中的原花青素提取得更完全，同时采用了全新的固定相和流动相，结合合理的流速、柱温、波长，使得整个方法的专属性更好、更有效、更稳定、能够更迅速、灵敏地测定荔枝核滴丸中的原花青素含量，从而有效地检测荔枝核滴丸的质量，保证用药安全。

具体实施方式

下面根据具体实施例对本发明的方法作进一步的详述，但本发明并不限于以下实施例。值得注意的是，本发明方法中的荔枝核滴丸按照中国发明专利申请CN102836265记载的方法制得；原花青素对照品等材料可经由商业渠道获得(例如本实施例来自上海同田生物技术股份有限公司)，所用到的乙腈、磷酸和甲醇等均为色谱纯。

实施例1