[发明专利]一种稳定的同型半胱氨酸检测试剂盒

说明书

技术领域

本发明涉及一种稳定的同型半胱氨酸检测试剂盒，属于临床体外检测技术领域。

背景技术

同型半胱氨酸(Homocysteine，Hcy)又称高半胱氨酸，是一种与半胱氨酸同系的、含硫含氨酸分解代谢的重要中间产物，不参与体蛋白质合成。血浆Hcy是一个总称，指血浆中所有形式的Hcy，包括还原型Hey，双硫Hcy，混合双硫半胱氨酸一Hcy和混合双硫蛋白质一Hey：正常情况下游离Hey很少，主要以蛋白质形式存在。很多因素如遗传、营养、肾功能不全、药物、激素等因素均可能影响体内同型半胱氨酸的代谢，造成高Hey血症。大量研究证明，高Hey是引起心、脑、外周血管病的一个新的、重要的独立性危险因素，Hcy和高血压之间有一定的相关性，提示高Hcy水平可能是高血压的一个相对危险因素。有效控制Hcy水平对高血压病例意义重大。

当前同型半胱氨酸的检测方法多种多样，其中常见的方法有HPLc法、HPLC法、mA法  、EUSA法和循环酶法等，其中HPLc法是经典的方法，循环酶法是最近推出的新的检测方法，HPLC法和mA法都具有较高的灵敏度和精密度，是应用最广泛的两种方法。而mA法操作更加简单速度也较快，但两者成本相对较高。EUSA法和循环酶法操作较简单并且成本也较低，而循环酶法在全自动生化分析仪上用，具操作简单和更快的检测速度，并有着较好的灵敏度和精密度，具有更加广泛的应用前景。样本中的氧化型同型半胱氨酸（Hcy)经还 原剂还原后，在同型半胱氨酸转甲基酶（HcyMetase)的催化作用下， 与S-腺苷-L-蛋氨酸（AdoMet)反应，生成S-腺苷-L-同型半胱氨酸(AdoHcy)和L-蛋氨酸（Met)。 S-腺苷-L-同型半胱氨酸在腺香同型 半胱氨酸酶（AdoHcyase)的作用下水解为L-同型半胱氨酸和腺苷(Ado )。反应生成的蛋氨酸与试剂中的三磷酸腺苷（ATP )在蛋氨酸 转腺苷酶（MAT)的作用下生成S-腺華-L-蛋氨酸（AdoMet)。样本 中的L-同型半胱氨酸反复循环反应，不断产生腺苷，腺普的生成速 率与样本中同型半胱氨酸的含量成正比，通过测定腺苦的生成速率， 就可以达到测定体液样本中同型半胱氨酸含量的目的。

现在市面上生产的同型半胱氨酸检测试剂为了提高其稳定性，多将其检测试剂设置为四试剂或者三试剂，甚至更多的试剂，当遇到只能做双试剂的生化分析仪器的时候，需要现场手工将试剂按比例混匀，并尽快用完，这样既增加了操作的繁琐性，又不利于试剂的长期保存，非常不利于检测试剂在全自动生化仪器上的推广。                                                                       

发明内容

本发明的目的在于提供一种稳定性好的同型半胱氨酸检测试剂。

本发明的技术方案如下：一种稳定的同型半胱氨酸检测试剂盒，包括体积比为240:65的试剂1和试剂2，试剂1和试剂2的组成及含量如下：

试剂1（R1）          

TRIS(三羟甲基氨基甲烷)缓冲液，                   PH 7.1     

EDTA.2Na（乙二胺四乙酸二钠）                     0.1~20mM

ATP                                                             0.1~90mM

S-腺苷甲硫氨酸（SAM）                             0.1~1mM

NADH                                                     0.3~1mM

三（2羧乙基）膦氯化氢（TCEP）                   0.5~1mM

α－酮戊二酸                                        5~10mM

牛血清白蛋白                                           0.1~1g/L

叠氮钠                                                    0.1 ~1 g/L     ； 

试剂2（R2）

TRIS(三羟甲基氨基甲烷) 缓冲液，                     Ph7.8