[发明专利]能抑制和杀灭多种耐药性细菌的多肽

说明书

技术领域

本发明涉及新多肽，特别是杀灭和抑制细菌的新多肽,具体是一组能抑制和杀灭多种耐药性细菌的新多肽。

背景技术

超级细菌，指由于滥用抗生素使得其抗药性越来越强的细菌，其抗药性强到现在的各种抗生素已经对其没有作用，所以给这类细菌统称超级细菌。超级细菌还特指耐甲氧苄青霉素（甲氧西林）金黄色葡萄球菌 (MRSA)，它是皮肤细菌的一种，由于一般抗生素很难杀死它，所以很难诊治。超级病菌也是一种耐药性细菌，这种超级病菌能在人身上造成浓疮和毒疱，甚至逐渐让人的肌肉坏死。更可怕的是，抗生素药物对它不起作用，病人会因为感染而引起可怕的炎症，高烧、痉挛、昏迷直到最后死亡。这种病菌的可怕之处并不在于它对人的杀伤力，而是它对普通杀菌药物——抗生素的抵抗能力，对这种病菌，人们几乎无药可用。2010年，英国媒体爆出：南亚发现新型超级病菌NDM-1，抗药性极强可全球蔓延。

由于超级细菌和超级病菌的出现，人类面临极大的威胁。因此，在现有抗生素无能为力的情况下，研发新型杀灭或者抑制抗耐药性细菌的药物，极为迫切。

发明内容

本发明的一个目的是提供杀灭和抑制细菌的新多肽,特别是能抑制和杀灭多种耐药性细菌的新多肽。

具体地，本发明涉及一组能抑制和杀灭多种耐药性细菌如耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(MRSA)、肺炎克雷伯菌(Klebsiella pneumonia), 鲍曼不动杆菌(Acinetobacter baumannii)和/或大肠杆菌等的新多肽。

本发明的能抑制和杀灭耐药性细菌的新多肽，其由XFP-10B、XFP-11、XHP-12B、XHP-14E或XHP-24B所对应的氨基酸序列组成：

XFP-10B: KRWFKIWKRR

XFP-11: WRWWKIWKRWR

XHP-12B: WVKRIKRFLRWL

XHP-14E: KRIVKRIKDFLRWL

XHP-24B: LLKELWTKIKRARKAVLRKIKRLL。

各序列中的字母为氨基酸的缩写：

A-丙氨酸 Ala 

R-精氨酸 Arg 

D-天冬氨酸 Asp 

E-谷氨酸 Glu 

I-异亮氨酸 Ile 

L-亮氨酸 Leu 

K-赖氨酸 Lys 

F-苯丙氨酸 Phe 

T-苏氨酸 Thr 

W-色氨酸 Trp 

V-缬氨酸 Val 。

本发明所述的新多肽的生产方法，为固相合成 –Boc法。这里用的是经典的多肽固相合成法中的Boc法，其中氨基酸使用D-氨基酸，在化学修饰时使N端乙酰化，C端氨基化。Boc合成法是采用TFA(三氟乙酸)可脱除的Boc为α-氨基保护基，侧链保护采用苄醇类。合成时将一个Boc－氨基酸衍生物共价交联到树脂上，用TFA脱除Boc，用三乙胺中和游离的氨基末端，然后通过Dcc活化、耦联下一个氨基酸，最终脱保护多采用HF法或TFMSA(三氟甲磺酸)法。从1963年Merrifield发展成功了固相多肽合成方法以来，经过不断的改进和完善，到今天固相法已成为多肽和蛋白质合成中的一个常用技术。其基本原理是：先将所要合成肽链的羟末端氨基酸的羟基以共价键的结构同一个不溶性的高分子树脂相连，然后以此结合在固相载体上的氨基酸作为氨基组份经过脱去氨基保护基并同过量的活化羧基组分反应，接长肽链。重复（缩合→洗涤→去保护→中和及洗涤→下一轮缩合）操作，达到所要合成的肽链长度，最后将肽链从树脂上裂解下来，经过纯化等处理，即得所要的多肽。其中α-氨基用BOC（叔丁氧羰基）保护的称为BOC固相合成法。用Boc法已成功地合成了许多生物大分子，如活性酶、生长因子、人工蛋白等。

具体包括：

一、树脂合成

1)  Peptide acid Merrifield Resin and PAM Resin

2)  Peptidecarboxamide MBHA Resin

二、肽链合成

1) 氨基酸的偶联；

2) N-端Boc基团的切除；

在HF切割以前须将 N-端Boc保护基团用TFA除去。手工切割N-端Boc基团方法是用TFA/DCM比为1：1的溶液在室温条件下洗涤反应15分钟。

三、切割

1）切割前的树脂准备:所有树脂在切割前必须完全的洗净和干燥。  

特殊情况处理: