[发明专利]一段具有明显镇痛作用的多肽

说明书

技术领域

本发明涉及一段多肽，尤其是涉及一段具有明显镇痛作用的多肽，该多肽能应用于神经病理性疼痛镇痛。 

背景技术

神经病理性疼痛已被公认是慢性痛之“王”，是临床最顽固的且对现有镇痛药几乎都不敏感的一类痛，无论周围或中枢起源的神经病理性疼痛都会对个体和社会持续造成很大的负担，尤其是残疾率的增加、生产力和生活质量的下降以及持续增长的医疗卫生投入等方面。因此深入研究神经病理性疼痛发生、发展、维持的机制，可为该病痛的诊疗提供理论依据，为新药的研发寻找新的靶点。 

越来越多的神经影像和电生理研究证实前扣带回(anterior cingulated cortex，ACC)参与了疼痛调节过程。无论是伤害性刺激还是被告知可能会有伤害性刺激，均能激活ACC脑区(Koyama,et.al.,Neuroreport1998；Rainville,et.al.,Science1997；Sikes,et.al.,J Neurophysiol1992)。ACC参与处理疼痛的不愉快感受并促进疼痛相关情感、认知和反应的抉择，参与痛觉情绪信息的编码，将痛的感觉和认知信息与情绪信息联合,从而形成完整的痛觉体验(Auvray,et.al.,Neurosci Biobehav Rev2010；Alexander,et.al.,NeuroImage2010)。在神经病理性疼痛动物ACC区EPSCs频率和振幅均增高(Li,et.al.,Science2010)。在CFA模型，ACC区突触前膜囊泡数量和递质释放均增多，而神经病理性疼痛模型动物ACC区突触前膜囊泡数量不增加仅递质释放增多。ACC区细胞因子IL-8和TNF-a能通过增加突触前膜递质的释放使突触传递增强而调节疼痛(Cu,et.al., Molecular Pain2012)。 

小窝是细胞膜上的微结构域---膜筏的重要一种，主要有胆固醇、鞘脂、小窝蛋白组成，是多种信号分子聚集进行信号交易的平台。小窝蛋白-1是小窝蛋白的一种，是细胞膜表面小窝的标记蛋白(Sargiacomo,et.al.,Proc Natl Acad Sci U.S.A.1995),Cav1作为支架蛋白与多种信号分子组成信号分子复合物，参与信号转导、物质转运、细胞增殖等活动(Okamoto,J.Biol.Chem.1998)。Cav1可募集谷氨酸受体和多种神经营养因子受体锚定于细胞膜上而增强神经元信号转导，NMDA受体和BDNF受体就是这样，Cav1敲除小鼠NMDA受体和BDNF受体介导的信号通路中断，恢复其表达后相关信号通路也恢复，Cav1也可使神经元树突分支增多等(Head,et.al.,J.Biol.Chem.2011)。在CFA诱导的大鼠神经炎性痛中，CFA足底注射24h后，其背根神经节Cav1mRNA表达增高，48h后又降低(Fiza,Methods in Molecular Biology2010)。 

ACC区是慢性疼痛调制的非常重要和关键脑区，对于其调控的具体分子机制还不清楚，信号分子总是通过支架蛋白组织在一起形成复杂的信号分子复合物，从而对细胞发挥精确、协调的功能调节。Cav-1是位于细胞膜信号交易活跃的微域---小窝上的主要蛋白(Lisanti,et.al.,Trends Cell Biol.1994；Couet,J.Biol.Chem.1997；Ostrom,Mol.Pharmacol2002)，能与多种信号分子形成复合物而对机体功能的调节发挥重要作用。我们已经证实神经病理性疼痛小鼠ACC区Cav-1表达增加，在ACC区定位注射靶向Cav-1的siRNA降低Cav-1的表达可缓解疼痛，采用慢病毒系统在ACC区过表达Cav-1可诱导疼痛，Cav-1的这种作用与其能使NR2B在神经元膜表面定位增加有关。于是我们根据文献报道的Cav-1和NR2B的蛋白质特性设计了一段多肽以干扰二者结合而达到减轻疼痛的目的。 

Cav-1的82-101位氨基酸构成了它的缴手架区，是其与其它信号分子相互作用的关键部位，特异性结合芳香族氨基酸残基，含有芳香族氨基酸的多肽可与体内固有与其相互作用的信号分子竞争结合其缴手架区，从而抑制Cav-1与信号分子的结合。文献报道Cav-1与NR2B有相互结合，我们用免疫共沉淀方法也同样检测到了二者的相互结合。而NR2B发挥功能主要依靠其碳末端。 

发明内容

本发明的第一个目的在于，提供一段具有镇痛作用的多肽。 

本发明的另一个目的在于，提供Cav-1作为治疗神经病理性疼痛的新靶点。 

提供该多肽在神经病理性疼痛镇痛中的应用。