[发明专利]生血宝制剂特征图谱及其建立方法

说明书

技术领域

本发明涉及药物质量控制技术领域，更为具体地说，涉及生血宝制剂特征图谱的建立方法。本发明还涉及由上述建立方法得到的生血宝制剂特征图谱。

背景技术

生血宝是由我国著名中医药学专家的经验方，经现代工艺制备而成。生血宝主要由制何首乌、女贞子、桑葚、墨旱莲、白芍、黄芪和狗脊这七味药材制成。几十年的临床应用证明生血宝具有养肝肾，益气血之功效，用于恶性肿瘤放化疗所致白细胞减少、神疲乏力、腰膝酸软、头晕耳鸣、心悸、失眠、咽干、食欲不振、食少等症状。

目前，根据生血宝中药方已制得多种剂型的生血宝制剂。市场上的生血宝制剂主要由颗粒剂、合剂等。通常，生血宝制剂的制备工艺为：将原料药材碎断后加水提取的水提物，按照现有常规的方法制成颗粒剂、片剂、丸剂、胶囊剂、口服液或合剂。生血宝制剂作为中成药，其药效是多种活性成分共同作用的结果。因此，生血宝制剂的多种活性成分含量是否达标是衡量生血宝制剂质量的重要因素。但是，目前的生血宝制剂的质量标准检测方法仅测定单一指标成份的含量，未对其它有效成份进行检测。这种检测方法存在一定的局限性，无法较全面反映生血宝制剂的质量水平。

发明内容

本发明提供一种生血宝制剂特征图谱的建立方法，以解决目前的生血宝制剂检测方法无法较全面反映生血宝制剂质量水平的问题。

为了解决上述技术问题，本发明提供如下技术方案：

生血宝制剂特征图谱的建立方法，包括以下步骤：

取芍药苷对照品溶解于50％-100％(体积)甲醇中以形成芍药苷对照品浓度为0.02mg/ml溶液，摇匀后得到参照物溶液；

取设定量的生血宝制剂溶解于0％-100％甲醇、0％-50％乙醇或25-125ml水，称重后通过回流提取或超声处理10-60min，冷却后，再称重量，然后用同种溶剂补重，摇匀，用微孔滤膜滤过，取续滤液作为供试品溶液，所述生血宝制剂为口服液或合剂，所述设定量为1.0-5.0ml，或者所述生血宝制剂为颗粒剂、片剂、胶囊剂、丸剂或生血宝制剂中间体，所述设定量为0.6-3.0g的粉末；

吸取所述参照物溶液和供试品溶液注入高效液相色谱仪，按照高效液相色谱法检测，得到生血宝制剂的特征图谱；其中，色谱柱为C₁₈反相色谱柱；采用梯度洗脱，且梯度洗脱液的流动相的流速为0.8ml/min-1.2ml/min；检测波长为200-230nm，柱温为25℃-40℃；梯度洗脱时间为60min-120min。

优选的，上述建立方法中，梯度洗脱液的流动相为乙腈-水、乙腈-(0.1％-0.2％)磷酸溶液、乙腈-0.1％甲酸溶液、甲醇-0.1％磷酸溶液、甲醇-0.1％甲酸溶液或甲醇-水。

优选的，上述建立方法中，所述梯度洗脱液的流动相为流动相A和流动相B组成，流动相A为乙腈，流动相B为0.1％(体积)磷酸溶液。

优选的，上述建立方法中，吸取所述参照物溶液和供试品溶液均为5μl注入高效液相色谱仪，所述梯度洗脱的时间为60min，采用如下方式进行梯度洗脱：

0-15min，流动相A的体积百分比为2％，流动相B的体积百分比为98％；

15-30min，流动相A的体积百分比为2％-15％，流动相B的体积百分比为98％-85％；

30-50min，流动相A的体积百分比为15％-25％，流动相B的体积百分比为85％-75％；

50-60min，流动相A的体积百分比为25％，流动相B的体积百分比为75％。

优选的，上述建立方法中，所述流动相的流速为1.0ml/min，所述C₁₈反相色谱柱的柱长为250nm。

生血宝制剂特征图谱，采用如上所述的建立方法获得，所述特征图谱通过取生血宝颗粒剂粉末0.6g溶解于25ml的甲醇溶液得到的供试品溶液检测得到，所述特征图谱具有7个特征峰，其中，5号峰以芍药苷为参照的参照峰，各个特征峰相对保留时间和相对标准偏差为：

1号峰：相对保留时间0.383±0.019，相对标准偏差为0.19％；

2号峰：相对保留时间0.672±0.034，相对标准偏差为0.07％；

3号峰：相对保留时间0.801±0.040，相对标准偏差为0.05％；

4号峰：相对保留时间0.956±0.048，相对标准偏差为0.01％；

5号峰：相对保留时间1.000±0.000，相对标准偏差为0.00％；

6号峰：相对保留时间1.143±0.057，相对标准偏差为0.01％；